[发明专利]一种从酵母细胞制备混合型核苷酸饲料添加剂的方法及应用

摘要

一种从酵母细胞制备混合型核苷酸饲料添加剂的方法及应用，属于酵母制备核苷酸及饲料添加剂技术领域。本发明以酵母细胞为原料，采用均质和盐法相结合的方法对细胞进行高效破壁处理；通过离心、分步等电结晶分离出细胞壁、蛋白质和其他不溶性物质；专门收集特定等电点时的核酸RNA沉淀，获得70％纯度的核酸湿粗品；将该核酸湿粗品溶于水后，用来自麦芽根的高活力磷酸二酯酶进行高效定向酶解反应，酶解结束后直接喷雾干燥、粉碎，获得含量超过60％的四种单体核苷酸(AMP、GMP、CMP、UMP)、蛋白含量低于10％的混合型核苷酸饲料添加剂产品。将这种饲料添加剂用于动物饲料，能显著改善动物肠道吸收功能，促进动物生长，提高免疫功能、抗病能力和抗应激能力。

主权项

1、一种从酵母细胞制备混合型核苷酸饲料添加剂的方法，其特征是制备工艺过程如下：(1)破壁：采用均质破壁与盐法破壁相结合的方法，将酵母混入水中，用高压均质机在30～40Mpa压力下均质破壁2～3次；然后加入固体食盐，溶解，配制成含10％干重计酵母细胞、3％～6％NaCl的酵母乳液；将酵母乳液置于反应釜中，通过蒸汽加热迅速升温至95℃～100℃；在95℃～100℃条件下搅拌保温2～5小时后，冷却至室温；(2)分离：将上述反应液离心分离，固体物为脱核酸酵母，富含酵母葡聚糖及甘露聚糖的细胞壁和不溶性的蛋白质；(3)等电结晶：母液用盐酸调节pH5.0～6.0，室温结晶后，离心分离，固型物为变性后的蛋白质和其他不溶性物质；剩下的母液继续用盐酸调节pH3.0～4.0，室温结晶，离心分离，固型物为变性后的蛋白质和其他不溶性物质；最后的母液进一步用盐酸调节pH1.0～2.5，室温结晶，离心分离，固型物为核糖核酸RNA湿粗品；将湿粗品烘干，粉碎，烘干物含70％核酸RNA；(4)制酶：麦芽根经粉碎、过筛、浸泡、离心，获得5’-磷酸二酯酶酶液；(5)酶解：将制备得到的核酸RNA溶于水中，按照每克核酸加入3000～6000U5’-磷酸二酯酶，进行定向酶解，70℃搅拌1～3小时后，迅速升温至90℃灭酶；(6)干燥：将上述酶水解液直接喷雾干燥，粉碎，筛分，获得含量超过60％的四种单体核苷酸AMP、GMP、CMP、UMP的混合型核苷酸饲料添加剂。