[发明专利]高活性重组脂酶的制备方法有效
| 申请号： | 200810200198.2 | 申请日： | 2008-09-22 |
| 公开（公告）号： | CN101684460A | 公开（公告）日： | 2010-03-31 |
| 发明（设计）人： | 李素霞;庞怀宇;许建和 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/20 | 分类号： | C12N9/20 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 徐 迅 |
| 地址： | 20023*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了高活性重组脂酶的制备方法。该方法包括：(a)将脂肪酶包涵体与3-10M尿素水溶液混合，从而溶解包涵体，获得含变性脂肪酶的变性溶液；(b)对步骤(a)的变性溶液在低离子强度的复性液中进行稀释复性，从而获得含活性脂肪酶的复性溶液；(c)对步骤(b)的复性溶液进行分离纯化，从而获得比活性大于或等于10000U/g的脂肪酶，或者对步骤(b)的复性溶液进行浓缩，从而获得含比活性大于或等于10000U/g的脂肪酶的浓缩溶液。本发明方法可高效地得高活性、高纯度的重组脂酶。 | ||
| 搜索关键词： | 活性 重组 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、一种脂肪酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(a)将脂肪酶包涵体与3-10M尿素水溶液混合，从而溶解包涵体，获得含变性脂肪酶的变性溶液；(b)对步骤(a)的变性溶液在低离子强度和pH 5.5-8.5的条件下进行稀释复性，从而获得含复性脂肪酶的复性溶液，其中所述的低离子强度是指溶液的离子强度小于或等于1.5mmol/L PBS水溶液的离子强度；(c)对步骤(b)的复性溶液进行分离纯化，从而获得比活性大于或等于10000U/g的脂肪酶，或者对步骤(b)的复性溶液进行浓缩，从而获得含比活性大于或等于10000U/g的脂肪酶的浓缩溶液。
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