[发明专利]中药附子及其提取物中生物碱指纹图谱的建立方法

摘要

本发明涉及一种中药附子或其提取物中生物碱指纹图谱的建立方法。该方法采用反相高效液相色谱法，用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以有机相-缓冲液为流动相，所述的有机相-缓冲液的pH值为3.0～8.0，检测波长230～240nm，有机相占流动相体积百分比的20～70％，其中，有机相为乙腈或甲醇；所述的缓冲液为醋酸铵-醋酸缓冲液、三乙胺-醋酸缓冲液、三乙胺-醋酸铵-醋酸缓冲液、三乙胺-乙酸铵-醋酸缓冲液中的一种；用适量乌头碱、新乌头碱或次乌头碱配制对照品溶液；配制供试品溶液；精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液分别注入高效液相色谱仪，制定中药附子及其提取物中生物碱指纹图谱。

主权项

1、一种中药附子及其提取物中生物碱指纹图谱的建立方法，采用反相高效液相色谱法，用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以有机相-缓冲液为流动相，其特征在于：所述的有机相-缓冲液的pH值为3.0～8.0，检测波长230～240nm，有机相占流动相体积百分比的20～70％，其中，有机相为乙腈或甲醇；所述的缓冲液为醋酸铵-醋酸缓冲液、三乙胺-醋酸缓冲液、三乙胺-醋酸铵-醋酸缓冲液、三乙胺-乙酸铵-醋酸缓冲液中的一种；配制对照品溶液：将适量乌头碱、新乌头碱或次乌头碱用流动相溶解，制成含乌头碱、新乌头碱或次乌头碱40～80μg/ml的对照品溶液；配制供试品溶液：将附子粉末用浓氨浸润30～60分钟，加入氨水饱和过的乙醚，超声震荡5～20分钟，3～8℃冷藏过夜，过滤，残渣用氨水饱和过的乙醚洗涤多次，过滤，合并滤液，挥干乙醚，以甲醇溶解，用流动相稀释制成供试品溶液，过0.22μm微孔膜；或者，将附子提取物用盐酸溶解，无水乙醚萃取，水层用氨液调pH至9～10，用无水乙醚萃取多次，合并乙醚萃取液，挥干乙醚，用流动相配成供试品溶液，过0.22μm微孔膜；测定：取上述对照品溶液和供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪，制定中药附子及其提取物中生物碱指纹图谱。