[发明专利]饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊的活性检测方法

摘要

饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊的活性检测方法，本发明涉及一种饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊的检测方法。本发明的方法解决了现有的饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊的检测方法成本高、精确度低以及无法确定隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊活性的问题。本发明的方法按照以下步骤进行：一、水样预处理；二、洗脱；三、浓缩；四、隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊的提纯；五、染色；六、镜检观察孢子虫卵囊和贾第虫孢囊，即实现了对饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊的检测。本发明方法不需要复杂的仪器设备，方法简单容易掌握，极大的减少了设备的投入，降低了检测成本，且能够检测出隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊有无活性，检测结果精确度高。

主权项

1、饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊的活性检测方法，其特征在于饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊的检测方法按照以下步骤进行：一、先用200～500目的筛网过滤水样，然后用孔径为1.5～3.5μm的滤膜进行抽滤；二、将步骤一抽滤后的滤膜置于烧杯中，用5～10mL、pH值为7.2的缓冲溶液进行清洗，收集清洗下的附着物；三、将步骤二收集的附着物放置于离心管中，在转速为2000～4000r/min的条件下离心10～20min，弃上清液；四、进行蔗糖梯度离心，在转速为1500～2500r/min的条件下离心5～15min，然后吸取离心管内的两层液面之间的中间层，放入到1.5mL的离心管中；其中蔗糖溶液由上至下质量浓度依次为12％～16％和20％～25％，上下两层蔗糖溶液体积相同；五、向步骤四的1.5mL的离心管中加入100μL、pH值为7.2缓冲溶液，10μL、质量浓度为2g/L的DAPI溶液和10μL、质量浓度为2g/L的PI溶液混合均匀，在37℃条件下温育2h，然后在转速为2000～4000r/min、离心时间为5～15min的条件下离心浓缩至9～11μL；六、将步骤五中离心浓缩得到的9～11μL的样品滴于血球计数板上，在波长为330～385nm紫外激发光源下和波长为520～550nm的绿光激发光源下进行荧光显微镜观察；即实现了对饮用水中隐孢子虫卵囊和贾第虫孢囊的检测。