[发明专利]丝氨酸蛋白酶抑制物及其制备方法无效
| 申请号： | 200810229594.8 | 申请日： | 2008-12-11 |
| 公开（公告）号： | CN101747431A | 公开（公告）日： | 2010-06-23 |
| 发明（设计）人： | 肖懿 | 申请（专利权）人： | 肖懿 |
| 主分类号： | C07K14/81 | 分类号： | C07K14/81;C12N15/15;C12N15/63 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 110003 辽宁省沈*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 丝氨酸蛋白酶抑制物及其制备方法属生物技术领域，涉及丝氨酸蛋白酶抑制物的长效重组，且涉及其制备方法。本发明是提供半衰期长，具有良好抗凝功能的丝氨酸蛋白酶抑制物。本发明首先在计算机工作站上模建了TFPI和LRP分子，然后将两者进行对接，将TFPI梭基末端267—304区域内的某些氨基酸进行不同程度的替代和缺失突变后，所述LTFPI的半衰期较TFPI延长10倍以上，并具备抗组织因子、凝血因子V工工/Vlla和凝血因子X/Xa功能。本发明还提供了制备LTFPI的方法，包括制备至少包含表达生物活性的LTFPI编码序列部分的cDNA，在适合表达的载体中克隆CDNA片断，用该载体转染宿主细胞，在适于表达该cDNA片断的条件下培养该宿主细胞，以及从培养物中回收和纯化所需LTFPI。 | ||
| 搜索关键词： | 丝氨酸 蛋白酶 抑制 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
丝氨酸蛋白酶抑制物，其特征在于，首先在计算机工作站上模建了TFPI和LRP分子，然后将两者进行对接，发现TFPI梭基末端的某些关键氨基酸在TFPI和LRP的相互作用发挥关键作用。本发明将TFPI梭基末端267一304区域内的某些氨基酸进行不同程度的替代和缺失突变后，两者的结合能力出现了不同程度的下降，所述LTFPI的半衰期较TFPI延长10倍以上，并具备抗组织因子、凝血因子V工工/Vlla和凝血因子X/Xa功能。其中将269、252、288和289位赖氨酸全部替换为丙氨酸的突变效果为佳。
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