[发明专利]一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法无效
申请号: | 200810233643.5 | 申请日: | 2008-11-25 |
公开(公告)号: | CN101418332A | 公开(公告)日: | 2009-04-29 |
发明(设计)人: | 苏源;李成云;朱有勇;杨静;刘林;王云月;孔垂思;常明;蔡永占 | 申请(专利权)人: | 云南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02 |
代理公司: | 昆明今威专利代理有限公司 | 代理人: | 刘明哲 |
地址: | 650201云南*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明提供一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法。水稻感病品种丽江新团黑谷生长至第4片叶完全展开时接种。选择在接种水稻叶片的中部最宽处,用致伤设备形成直径1mm的压伤斑1个,将稻瘟病菌氮饥饿培养后或致病基因重组表达后得到的蛋白在致伤处接种,蛋白的接种浓度为1μg/μl,接种体积为3μl。接种后72小时在水稻叶片上形成的病斑为椭圆形,测量向叶尖和叶基方向延伸的最长值作为病斑的长度值,该值是比较不同蛋白致病力大小的依据。其分类标准为:病斑长度为1.5mm至2mm之间为弱致病性;病斑长度在2.1mm至3mm之间为中等致病性;病斑长度大于3.1mm为强致病性。该方法对于研究稻瘟病菌致病相关基因和蛋白的功能具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 稻瘟病 致病 蛋白 方法 | ||
【主权项】:
1、一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法,其步骤为:(1)水稻感病品种丽江新团黑谷生长至第4片叶完全展开时接种;(2)选择在接种水稻叶片的中部最宽处,用致伤设备形成直径1mm的压伤斑1个,将稻瘟病菌在完全培养基中培养后转入到不含有氮源的培养基中,进行氮饥饿培养而获得的致病蛋白或致病基因在大肠杆菌中表达后得到的蛋白在致伤处接种,蛋白的接种浓度为1μg/μl,接种体积为3μl;(3)接种后72小时在水稻叶片上形成的病斑为椭圆形,测量向叶尖和叶基方向延伸的最长值作为病斑的长度值;(4)将稻瘟病菌致病蛋白致病性大小按病斑长度值划分的标准进行致病性弱、中等和强的分类;其分类标准为:病斑长度为1.5mm至2mm之间为弱致病性;病斑长度在2.1mm至3mm之间为中等致病性;病斑长度大于3.1mm为强致病性。
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