[发明专利]甘蔗细胞悬浮液制备方法无效
| 申请号： | 200810233740.4 | 申请日： | 2008-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN101434932A | 公开（公告）日： | 2009-05-20 |
| 发明（设计）人： | 赵培方;陈学宽;侯朝祥;刘新龙;催杰;吴才文;刘家勇;赵俊;杨坤 | 申请（专利权）人： | 云南省农业科学院甘蔗研究所 |
| 主分类号： | C12N5/04 | 分类号： | C12N5/04 |
| 代理公司： | 昆明正原专利代理有限责任公司 | 代理人： | 陈 左 |
| 地址： | 661600云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 甘蔗细胞悬浮液制备方法，以甘蔗新叶作为外植体，采用三次固体培养基培养得到颗粒状甘蔗愈伤组织，甘蔗愈伤组织接种到N6液体培养基中，在转速为120rpm/min、温度为28℃的摇床上振荡培养12天后，将培养液中的悬浮液转接到离心管中，在转速为5000rpm的转速下离心20分钟，去除上清液；留下的离心沉积物转接到N6液体培养基中，在转速为120rpm/min、温度为28℃的摇床上振荡培养48小时，即可得到分散均匀的甘蔗细胞悬浮液；本发明简化了液体培养过程中多次更换液体培养基以达到细胞数量增殖的操作过程，缩短了液体振荡培养周期，不需要多次更换液体培养基，降低了材料因多次更换液体培养基导致污染的风险。 | ||
| 搜索关键词： | 甘蔗 细胞 悬浮液 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、一种甘蔗细胞悬浮液制备方法，其特征在于：以甘蔗新叶作为外植体，采用三次固体培养基培养得到颗粒状甘蔗愈伤组织，第一次培养时间15～20天，第二次和第三次培养时间各为25～30天；颗粒状甘蔗愈伤组织接种到N6液体培养基中，在转速为120rpm/min、温度为28℃的摇床上振荡培养12天后，将培养液中的悬浮液转接到离心管中，在转速为5000rpm的转速下离心20分钟，去除上清液；留下的离心沉积物转接到N6液体培养基中，在转速为120rpm/min、温度为28℃的摇床上振荡培养48小时，即可得到分散均匀的甘蔗细胞悬浮液。
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