[发明专利]产生表达高水平感兴趣蛋白质的稳定细胞系的方法无效
| 申请号： | 200880024990.5 | 申请日： | 2008-07-16 |
| 公开（公告）号： | CN101755051A | 公开（公告）日： | 2010-06-23 |
| 发明（设计）人： | T·K·克罗弗德麦克法德;M·杨 | 申请（专利权）人： | 默克雷兰诺有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/65 | 分类号： | C12N15/65;C12N15/67;C12N15/79 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陶家蓉 |
| 地址： | 瑞士科*** | 国省代码： | 瑞士;CH |
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| 摘要： | 本发明涉及蛋白质的工业生产。更具体地说，本发明涉及一种即使无选择压力的情况下培养，也能够获得稳定地表达感兴趣蛋白质的细胞的方法。使用DHFR作为替代标记。转染细胞的选择不是基于对有毒化合物的抗性，而是基于使用荧光MTX的FACS所测定的荧光。 | ||
| 搜索关键词： | 产生 表达 水平 感兴趣 蛋白质 稳定 细胞系 方法 | ||
【主权项】：
一种筛选表达感兴趣蛋白质(POI)的细胞的方法，包括以下步骤：a)使用以下物质转染细胞：(i)编码所述感兴趣蛋白质的核酸；和(ii)编码二氢叶酸还原酶(DHFR)的核酸；b)使用与DHFR结合的荧光化合物测定DHFR的表达；以及c)基于相对的高DHFR表达选择大约0.001％至大约25％在步骤b)中测试的细胞；其中所述细胞的选择不是基于对步骤a)和b)之间有毒化合物的抗性。
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