[发明专利]酵母中生产乙酰-CoA的酶有效
| 申请号： | 200880100320.7 | 申请日： | 2008-07-11 |
| 公开（公告）号： | CN101939433A | 公开（公告）日： | 2011-01-05 |
| 发明（设计）人： | 乌尔里克·玛丽亚·穆勒尔;吴亮;罗拉纳·麦德勒尼·拉姆斯多克;亚伦·阿迪瑞安·文科勒 | 申请（专利权）人： | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12P7/16 |
| 代理公司： | 北京东方亿思知识产权代理有限责任公司 11258 | 代理人： | 肖善强;南霆 |
| 地址： | 荷兰*** | 国省代码： | 荷兰;NL |
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| 摘要： | 本发明涉及鉴定异源多肽的方法，所述异源多肽具有在酵母细胞(的胞质溶胶)中将丙酮酸、乙醛或乙酸转化为乙酰-CoA的酶活性，所述方法包括：a)提供突变的酵母细胞，其包含至少一种(PDH)旁路基因的缺失，所述基因选自编码丙酮酸脱羧酶(PDC)、乙醛脱氢酶(ALD)和乙酰-CoA合成酶(ACS)的基因；b)用包含下述异源核苷酸序列的表达载体转化所述突变的酵母细胞，所述异源核苷酸序列编码具有将丙酮酸、乙醛或乙酸转化为乙酰-CoA的潜在酶活性的候选多肽；c)针对在含葡萄糖作为唯一碳源的最小培养基上生长的能力，测试所述重组突变的酵母细胞，和d)当观察到所述细胞的生长时，将所述候选多肽鉴定为具有在所述酵母细胞(的胞质溶胶)中将丙酮酸、乙醛或乙酸转化为乙酰-CoA的酶活性的异源多肽。本发明还涉及生产发酵产物例如丁醇的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 酵母 生产 乙酰 coa | ||
【主权项】：
鉴定下述异源多肽的方法，所述异源多肽在酵母细胞(的胞质溶胶)中具有将丙酮酸、乙醛或乙酸转化为乙酰‑CoA的酶活性，所述方法包括：‑提供突变的酵母细胞，其中所述突变包括至少一种(PDH)旁路基因的失活，所述基因选自编码丙酮酸脱羧酶(PDC)、乙醛脱氢酶(ALD)和乙酰‑CoA合成酶(ACS)的基因；‑用下述表达载体转化所述突变的酵母细胞，所述表达载体包含与酵母中有功能的启动子可操作地连接的至少一种异源核苷酸序列，并且所述异源核苷酸序列编码具有将丙酮酸、乙醛或乙酸转化为乙酰‑CoA的潜在酶活性的候选多肽；‑针对在含葡萄糖作为唯一碳源的最小培养基上生长的能力，测试所述重组突变的酵母细胞，和‑当观察到所述细胞的生长时，将所述候选多肽鉴定为具有在所述酵母细胞(的胞质溶胶)中将丙酮酸、乙醛或乙酸转化为乙酰‑CoA的酶活性的异源多肽。
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