[发明专利]DNA扩增方法

摘要

本发明总体涉及扩增感兴趣的核酸区域的方法，更特别地涉及用PCR方法扩增感兴趣的核酸区域的方法，所述PCR方法设计为用于使从结合非感兴趣的特异性区域的核酸区域的引物的扩增子产生最小化。本发明方法基于下述的确定，即通过使正向引物或反向引物的功能性低效，不相关核酸区域的扩增速率能相对于感兴趣区域的扩增而言降低。提供感兴趣的核酸区域的选择性扩增的手段可具有一系列应用，包括但非限于特征在于特定基因序列的疾病状况的诊断和/或监测，感兴趣基因区域的鉴定或分析，DNA断裂点区域的鉴别或鉴定，感兴趣基因序列的分离，其中仅感兴趣基因序列一个末端的核苷酸序列是已知的。

主权项

扩增感兴趣核酸区域的方法，所述方法包括：(i)使核酸样品接触：(a)针对所述感兴趣区域的一或多个正向引物；及(b)针对所述感兴趣区域的一或多个反向引物其中组(a)或组(b)引物是功能上低效的并在它们的5’末端可操纵地连接寡核苷酸标记；(ii)通过至少两个扩增循环扩增步骤(i)的核酸样品；(iii)将步骤(ii)的扩增的核酸与针对互补于步骤(i)的寡核苷酸标记的序列的部分或全部序列的引物接触；及(iv)扩增步骤(iii)的核酸样品。