[发明专利]增强含脂肪酶酵母细胞透性的方法

摘要

一种增强含脂肪酶酵母细胞透性的方法，采用对酵母细胞细胞壁和细胞膜有改善作用的有机化合物为细胞透性改善剂，对培养成熟的产脂肪酶酵母细胞浸泡而成；所述有机化合物的选取酮、卤代烃和芳香族化合物中的一种为细胞透性改善剂；配制1.0～15％浓度的有机化合物与水的混合物，将培养成熟的产脂肪酶酵母细胞浸泡于混合液中，在20～40℃浸泡15～90min；经去离子水洗、风干而成。所得透性酵母细胞脂肪酶活力为对照的4.5～5.2倍，在不提取细胞内酶的情况下，能够充分发挥细胞内酶活性，以期降低生物催化剂的制备成本。

主权项

1、一种增强含脂肪酶酵母细胞透性的方法，其特征在于采用对酵母细胞细胞壁和细胞膜有改善作用的有机化合物为细胞透性改善剂，对培养成熟的产脂肪酶酵母细胞浸泡而成；其方法包括如下步骤：a、产脂肪酶酵母细胞的菌种活化：在葡萄糖(20g/L)、酵母粉(10g/L)、蛋白胨(10g/L)和琼脂(20g/L)的斜面培养基上，于30℃静止培养72h；b、产脂肪酶酵母细胞的液体种子培养：在葡萄糖(100g/L)、蛋白胨(5.3g/L)、酵母粉(2g/L)、尿素(2g/L)和MgSO4(0.5g/L)的液体培养基中，于30℃、160r/min摇床培养24h；c.产脂肪酶酵母细胞的发酵液：在葡萄糖(100g/L)、蛋白胨(1.8g/L)，酵母粉(0.5g/L)、KH2PO4(2g/L)且pH值自然的液体培养基中，于30℃、160r/min摇床发酵72h；d、产脂肪酶酵母细胞的收集：将发酵液过滤得成熟的湿酵母细胞，用生理盐水洗涤湿细胞3次；e、有机化合物的选取：选择酮、卤代烃和芳香族化合物中的一种为细胞透性改善剂；f、细胞浸泡：根据所选改善剂的特征，配制1.0～15％浓度的有机化合物与水的混合物，将培养成熟的产脂肪酶酵母细胞浸泡于混合液中，在20～40℃浸泡15～90min；g、收集浸泡处理的细胞：过滤收集浸泡的细胞，再用去离子水清洗3次；h、细胞干燥：于室温下自然风干24～48h。其中，所述的酮为丙酮、丁酮或异戊酮；所述的卤代烃为二氯甲烷、三氯甲烷或四氯化碳；所述的芳香族化合物为甲苯、乙苯或丙基苯。