[发明专利]一种高稳定性藻蓝蛋白类融合荧光蛋白质的制备方法无效
申请号: | 200910019914.1 | 申请日: | 2009-03-14 |
公开(公告)号: | CN101838661A | 公开(公告)日: | 2010-09-22 |
发明(设计)人: | 秦松;陈华新;刘少芳 | 申请(专利权)人: | 中国科学院海洋研究所 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12P21/02;C12R1/89;C12R1/19 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 俞鲁江 |
地址: | 266071 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开一种高稳定性藻蓝蛋白类融合荧光蛋白质的制备方法,属于分子生物学技术领域。包括以下步骤:1)将藻蓝蛋白脱辅基蛋白基因和麦芽糖结合蛋白融合,并与色基裂合酶基因(cpcE和cpcF)克隆到表达载体的第一个表达框,藻胆素生物合成酶基因(hox1和pcyA)克隆到同一载体的第二个表达框,得到一个含有多个相关基因的表达质粒;2)将上述表达质粒转化大肠杆菌后,筛选得到高产菌,应用此工程菌发酵,经蛋白的分离纯化,得到荧光类融合藻蓝蛋白。本发明有以下优点:1.提高了重组荧光蛋白的水溶性和稳定性;2.缩短生产周期,节约能源,利用率高。 | ||
搜索关键词: | 一种 稳定性 蛋白 融合 荧光 蛋白质 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种荧光类融合藻蓝蛋白的生物合成方法,其特征包括以下步骤:1)将藻蓝蛋白脱辅基蛋白基因和麦芽糖结合蛋白融合,并与色基裂合酶基因(cpcE和cpcF)克隆到表达载体的第一个表达框,藻胆素生物合成酶基因(hox1和pcyA)克隆到同一载体的第二个表达框,得到一个含有多个相关基因的表达质粒;2)将上述表达质粒转化大肠杆菌后,筛选得到高产菌,应用此工程菌发酵,经蛋白的分离纯化,得到荧光类融合藻蓝蛋白。
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