[发明专利]一种野葛藤提取物HPLC指纹图谱的构建方法

摘要

本发明涉及一种野葛藤提取物HPLC指纹图谱的构建方法，主要包括以下步骤：取野葛藤药材，用乙醇回流提取得醇提物粉末，用95％的乙醇溶解，定容，滤过，得供试品溶液；然后进行高效液相色谱分析，Diamonsil^TM C₁₈色谱柱，检测波长250nm，流动相为乙腈-0.5％乙酸水溶液；得到野葛藤提取物HPLC指纹图谱。本发明的方法精确，稳定，重现性好，操作简便，容易掌握，所得指纹图谱中各共有特征峰分离良好，易于辨认，能较严格地评价和控制野葛藤提取物的内在质量。

主权项

1. 一种野葛藤提取物HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：称取野葛藤药材，每50g加入65％～75％(V/V)的乙醇300～350mL，回流提取3次，每次1～2h，合并提取液，回收乙醇，浓缩至比重1.12后离心，取上清液上大孔树脂柱，依次用2倍柱体积的纯化水、5倍柱体积的70％(V/V)乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩，喷雾干燥，干燥成细粉；取上述细粉约5mg，精密称定，置25ml容量瓶中，加95％(V/V)的乙醇10ml溶解，加重蒸水定容至刻度，用微孔滤膜滤过，所得续滤液即为供试品溶液；(2)高效液相色谱分析：色谱条件：DiamonsilTM C18色谱柱，250mm×4.6mm，5μm；检测波长250nm，流动相流速1.0ml/min，柱温为室温，进样量为10μl；流动相A为乙腈，流动相B 0.5％(V/V)的乙酸水溶液，采用梯度洗脱，洗脱程序如下：其中下述比例为体积比：0min时，流动相A：流动相B＝15∶85；40min时，流动相A：流动相B＝40∶60；60min时，流动相A：流动相B＝50∶50；(3)精确吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，按上述条件操作，得到野葛藤提取物的HPLC指纹图谱。