[发明专利]一种四环素严紧调控的真核表达载体无效
| 申请号： | 200910021010.2 | 申请日： | 2009-01-21 |
| 公开（公告）号： | CN101481704A | 公开（公告）日： | 2009-07-15 |
| 发明（设计）人： | 于军;陈宝莹;陈健康;刘利兵;张学策;刘芳娥;梁向艳;杨芳;黄小军 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第四军医大学 |
| 主分类号： | C12N15/79 | 分类号： | C12N15/79;C12N15/64 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 | 代理人： | 陆万寿 |
| 地址： | 710032*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 一种四环素严紧调控的真核表达载体，其分别引入如下DNA元件：hCMV、rtTA2S-M2、IRES、EGFP-Puro、编码荧光素酶的元件(Luc)和Ptetbi-RFC，应用于外源性兴趣基因在真核细胞中的表达和筛选。该载体转染后受到Tet或Dox严紧控制，并且基因的表达水平通过加入Tet或Dox的量进行定量调节；通过检测Luc荧光素酶的活性就可以间接检测兴趣基因的表达水平；载体的转染效率可以通过检测绿色荧光细胞的比例来完成；稳定转染的细胞通过流式细胞仪分选，使得确定兴趣基因的表达简洁、方便；而且所筛选得到的稳定细胞系，兴趣基因已经整合于宿主的基因组，具有长期稳定表达的特性和优势。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 四环素 严紧 调控 表达 载体 | ||
【主权项】：
1、一种四环素严紧调控的真核表达载体，包括启动子，其特征在于，沿启动子方向分布有编码四环素反应表达框抑制子的rtTA2S-M2和四环素反应表达框，所述的四环素反应表达框包括四环素控制的双向启动子Ptetbi；所述rtTA2S-M2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，Ptetbi的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
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