[发明专利]动物血液体外酶促降解提取胆红素的生产方法

摘要

本发明是一种动物血液体外酶促降解提取胆红素的生产方法。它包括血红素的提取、血红素的生物转化和胆红素的提取与精制三大步骤。本发明重大的改进点是在血红素的生物转化中不用提取和纯化血红素加氧酶和胆绿素还原酶，而是用收集动物新鲜肝脏和脾脏细胞液来建立血红素加氧酶和胆绿素还原酶的反应系统，大大降低了已有酶促降解法的工艺难度，使其向工业化生产迈进了一大步。另外，在酸性丙酮萃取血红素中，本发明用直接调节萃取液的pH值，使血红素自然沉淀，抽滤得到的丙酮可反复使用，避免了蒸馏回收丙酮带来的溶剂损失，降低能耗和污染。本发明还具有工艺步骤设计合理、简便易行、血红素转化率高、产品品质好等优点。

主权项

1、一种动物血液体外酶促降解提取胆红素的生产方法，其步骤如下：(1)、血红素的提取：取新鲜动物血液经抗凝后，用血液分离机分离除去血浆，所得的红细胞经反复冻融，使红细胞破裂，然后用PH值为2～3的酸性丙酮萃取血红素，血红素溶于萃取液中，珠蛋白沉淀，过滤，除去珠蛋白沉淀物，再用碱液调节滤液的PH值至3.5-5.5，则血红素自然沉淀，抽滤，得血红素，滤液为丙酮溶剂，加酸后仍作为萃取剂重复使用；(2)、血红素的生物转化：将动物肝脏和脾脏用胶体磨磨碎，其浆液经反复冻融，使细胞破裂，过滤除去有形物质，得酶促降解液备用，用PH值为6.5～7.5的缓冲溶液溶解(1)步所得的血红素，再将所得的酶促降解液和血红素溶液按1∶10～50的体积比混合均匀，混合液在37℃下反应25～60分钟，加热至50-80℃，终止反应，过滤，得粗品胆红素和蛋白的共沉淀物；(3)、胆红素的提取和精制在(2)步所得的粗品胆红素和蛋白的共沉淀物中加入10倍体积量的三氯甲烷或二氯甲烷，充分搅拌均匀，静置，收集上层的有机溶剂，下层的残渣再反复进行如上提取操作2～3次，最后收集有机溶剂层，减压回收有机溶剂近干时，再加入残留液10倍体积量的乙醇继续蒸馏，胆红素精品即析出。