[发明专利]一种保持甘蓝RGMS雄性不育系的繁殖方法

摘要

本发明公开了一种保持甘蓝RGMS雄性不育系的繁殖方法，选取甘蓝雄性不育系花茎叶片，按照一定大小接种在不定芽分化诱导培养基上培养，当不定芽生长至2.0～4.0cm高时，转接到不定根分化诱导培养基中培养获得完整再生苗。随后将再生苗移至培养土中进行培养，当幼苗生长有6～8片真叶时，适应性炼苗3～5天后定植于田间(露地)，秧苗成活率达95％以上。采用本发明方法能够提高甘蓝育种效果，保证并扩大了甘蓝雄性不育性的正常繁育。克服了甘蓝雄性不育性田间正常繁育的繁琐，不但保持了不育系，并且大幅度提高了其繁殖系数，为大量制种提供了保证。

主权项

1.一种保持甘蓝RGMS雄性不育系的繁殖方法，其特征在于，包括下列步骤：1)外植体选择以甘蓝RGMS雄性不育系的不育株msms授可育株Msms花粉后收获的种子，适宜时期播种育苗定植，秋季培养为成株或半成株，翌年植株生殖生长抽薹进入初花期，根据花朵雄蕊退化的指示性状，选择雄性不育植株花茎上着生的茎生叶片，切成边长为0.8～1.0厘米的小片作为离体培养的外植体；2)茎生叶片的分化诱导把外植体接种到MS培养基上，在温度25±1℃，每天光照14～16h，光照强度2000～2500Lx条件下培养40～50天诱导出丛生芽；丛生芽的继代增殖：将诱导产生的丛生芽切割成单芽转入MS培养基中培养25～30天诱导出丛生芽，再将丛生芽切割成单芽在MS培养基上继代2～3代，芽的数量得到100倍以上增殖；上述的MS培养基中含质量百分比为3％蔗糖、0.8％琼脂，1.0～2.0mg/L的6-苄基腺嘌呤及0.1～0.2mg/L的2，4-二氯化苯氧基乙酸；3)分化芽的生根诱导待丛生芽生长至2.0～4.0cm高，自单芽基部切下将其转接至1/2MS培养基上，在温度25±1℃，每天光照10h～12h，光照强度2000～2500Lx的条件下培养15～20天诱导生根，获得生根苗；上述的1/2MS培养基中含质量百分比为3％蔗糖、0.8％琼脂，0.1～0.3mg/L的α-萘乙酸、0.1～0.2mg/L吲哚乙酸；4)生根苗的移栽与定植将生根苗锻炼3～5天，移植到装有土壤的塑料钵中促使其缓苗生长，在甘蓝RGMS雄性不育系的适宜制种期将长有6～8片真叶的再生苗定植。