[发明专利]一种雌激素受体拮抗剂类内分泌药物耐药性的预测方法

摘要

本发明公开了一种雌激素受体拮抗剂类内分泌药物耐药性的预测方法，采用实时定量PCR法检测ERα和ERβ在乳腺癌的相对表达水平，以对雌激素受体拮抗剂类内分泌药物耐药性做出预测，将待测目标ERα和ERβ基因的相对表达水平与正常对照进行对比，分析雌激素受体拮抗剂类内分泌药物的耐药性：当待测目标ERα/ERβ比值大于正常对照组时，其雌激素受体拮抗剂类内分泌药物耐药性为阴性；当待测目标ERα/ERβ比值小于正常对照组时，其雌激素受体拮抗剂类内分泌药物耐药性为阳性。本发明提供的耐药性的预测方法，为指导临床乳腺癌个体化用药提供可行性基础，能够减少盲目用药导致的耐药反应和副作用。

主权项

1、一种雌激素受体拮抗剂类内分泌药物耐药性的预测方法，其特征在于，采用实时定量PCR法检测ERα和ERβ在乳腺癌的相对表达水平，以对雌激素受体拮抗剂类内分泌药物的耐药性做出预测，具体包括以下步骤：1)设计并合成ERα的PCR扩增引物对P1和ERβ的PCR扩增引物对P2：引物对P1为：上游引物：gcagggagag gagtttgtgt 20；下游引物：atgtgggaga ggatgaggag 20；引物对P2为：上游引物：tgtctgcagc gattacgca 20；下游引物：gcgccggttt ttatcgatt 19；2)作为对照的正常组织ERα和ERβ基因的mRNA表达水平检测：以乳腺癌旁5cm外的乳腺组织作为正常组织，破碎乳腺癌旁5cm外的乳腺活检组织细胞，提取细胞总RNA，反转录获得其cDNA基因组作为模板，分别以P1和P2作为引物，相对实时荧光PCR检测ERα和ERβ基因的mRNA表达水平作为正常对照；3)待测乳腺癌ERα和ERβ基因的mRNA相对表达水平检测：破碎待测乳腺癌活检组织的细胞，提取细胞总RNA，反转录获得其cDNA基因组作为模板，分别以P1和P2作为引物，相对实时荧光PCR检测ERα和ERβ基因的mRNA相对表达水平；4)将待测乳腺癌活检组织的ERα和ERβ基因的相对表达水平与正常对照进行对比，分析雌激素受体拮抗剂类内分泌药物的耐药性：当待测乳腺癌活检组织的ERα/ERβ的比值大于正常对照的ERα/ERβ的比值时，该待测乳腺癌活检组织对雌激素受体拮抗剂类内分泌药物表现为不耐药性；否则，该待测乳腺癌活检组织对雌激素受体拮抗剂类内分泌药物表现为耐药性。