[发明专利]一种基于禽类腺相关病毒的基因打靶载体及其构建方法无效
| 申请号： | 200910025759.4 | 申请日： | 2009-03-09 |
| 公开（公告）号： | CN101503705A | 公开（公告）日： | 2009-08-12 |
| 发明（设计）人： | 徐世永;刘红林 | 申请（专利权）人： | 金陵科技学院;刘红林;徐世永 |
| 主分类号： | C12N15/861 | 分类号： | C12N15/861;C12R1/93 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙） | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 210000江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开一种基于禽类腺相关病毒的基因打靶载体及其构建方法，该载体是以禽类腺相关病毒为骨架，在5′、3′LTR内侧各接入1个同源臂，在这2个同源臂之间接入正选抗性基因组件，在正选抗性基因组件及同源臂之间各加入了一个绝缘子元件。该构建方法包括(1)禽类腺相关病毒的基因转移载体的构建；(2)构建pMD19-2HS4质粒；(3)OV全序列扩增；(4)基因打靶载体各组件的扩增及PCR拼接；(5)基因打靶载体的构建。本发明的基因打靶载体，能有效抑制基因打靶过程中的位置效应，提高阳性克隆筛选效率，同时还能抑制随机整合，提高阳性克隆同源重组效率。对于非活性基因或时空特异表达基因有较高的基因导入效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 禽类 相关 病毒 基因 打靶 载体 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
1、一种基于禽类腺相关病毒的基因打靶载体，其特征在于，该载体是以禽类腺相关病毒为骨架，在5′、3′LTR内侧接入同源臂HA1和HA2，在同源臂HA1和HA2之间接入正选抗性基因表达组件，在正选抗性基因表达组件及同源臂HA1和HA2之间各加入了一个绝缘子元件。
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