[发明专利]密码子优化的乙型肝炎核酸疫苗有效
申请号: | 200910025821.X | 申请日: | 2009-03-10 |
公开(公告)号: | CN101502650A | 公开(公告)日: | 2009-08-12 |
发明(设计)人: | 邢益平;王世霞;卢山;黄祖瑚 | 申请(专利权)人: | 邢益平;王世霞 |
主分类号: | A61K39/29 | 分类号: | A61K39/29;A61P1/16;A61P31/20 |
代理公司: | 南京中新达专利代理有限公司 | 代理人: | 孙 鸥;朱 杰 |
地址: | 210029*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种密码子优化的乙型肝炎病毒核酸疫苗。本发明经分析乙型肝炎表面抗原(HBs)基因序列(adr亚型),找出其密码子使用偏好与哺乳动物密码子使用偏好不同的密码子位点,对HBs基因序列的密码子进行替换,得到表面抗原基因,再将该基因序列合成,经扩增得到经密码子优化的MHBs,Pst I、BamH I,双酶切MHBs基因和载体pSW3891质粒,配制10ul的连接体系,得到中蛋白基因。本发明解决了原核生物与真核生物在密码子使用偏好上存在差异,导致外源基因在哺乳动物宿主体内不能有效表达,不能产生较好免疫保护作用的缺陷。本发明显著提高了外源基因在哺乳动物宿主体内的蛋白表达量,有效的刺激了宿主的免疫系统,使之产生较好的体液免疫反应和细胞免疫反应。 | ||
搜索关键词: | 密码子 优化 乙型肝炎 核酸 疫苗 | ||
【主权项】:
1. 密码子优化的乙型肝炎病毒表面抗原核酸疫苗,其特征在于构建核酸疫苗的表面抗原基因是按照高级哺乳动物密码子使用偏好进行优化的,优化后的表面抗原目的基因序列如下:ATGGGCGGCTGGTCCAGCAAGCCCCGGCAGGGCATGGGCACCAACCTGAGCGTGCCCAACCCCCTGGGCTTCTTCCCCGATCACCAGCTGGACCCCGCCTTCGGCGCCAACAGCAACAATCCCGACTGGGACTTCAACCCCAACAAGGACCACTGGCCCGACGCCAACCAGGTGGGAGCCGGCGCCTTCGGCCCTGGCTTCACCCCTCCCCACGGCGGACTGCTGGGCTGGTCTCCTCAGGCCCAGGGCATCCTGACCACCGTGCCTGCCGCCCCTCCTCCCGCCAGCACCAACCGGCAGAGCGGCAGGCAGCCCACCCCCATCAGCCCCCCTCTGCGGGACAGCCACCCCCAGGCCATGCAGTGGAACAGCACCACCTTCCACCAGGCCCTGCTGGACCCCAGAGTGCGGGGCCTGTACTTCCCTGCCGGCGGAAGCAGCAGCGGCACCGTGAACCCCGTGCCCACCACCGCCAGCCCCATCTCCAGCATCTTCAGCCGGACCGGCGACCCTGCCCCCAACATGGAATCCACCACCTCCGGCTTTCTGGGCCCCCTGCTCGTGCTCCAGGCCGGCTTCTTCCTGCTGACCAGAATCCTGACCATCCCCCAGAGCCTGGACTCCTGGTGGACCAGCCTGAACTTCCTGGGCGGCGCTCCCACCTGCCCTGGCCAGAACAGCCAGAGCCCCACCTCCAACCACAGCCCTACCAGCTGCCCCCCCATCTGCCCCGGCTACCGGTGGATGTGCCTGCGGCGGTTCATCATCTTTCTGTTCATCCTGCTGCTGTGCCTGATCTTTCTGCTGGTGCTGCTGGACTACCAGGGCATGCTGCCCGTGTGCCCTCTGCTGCCCGGCACCAGCACCACAAGCACCGGCCCCTGCAAGACCTGCACCATCCCCGCCCAGGGAACCAGCATGTTCCCTAGCTGCTGCTGCACCAAGCCCAGCGACGGCAACTGCACCTGCATCCCCATCCCTAGCAGCTGGGCCTTCGCCCGGTTCCTGTGGGAGTGGGCCAGCGTGAGGTTCAGCTGGCTGTCTCTGCTGGTGCCCTTCGTGCAGTGGTTCGCCGGCCTGAGCCCCACCGTGTGGCTGTCCGTGATCTGGATGATGTGGTACTGGGGCCCTAGCCTGTACAACATCCTGAGCCCCTTTCTGCCCCTGCTGCCTATCTTCTTCTGCCTGTGGGTGTACATCTGA其编码的氨基酸序列如下:MGGWSSKPRQGMGTNLSVPNPLGFFPDHQLDPAFGANSNNPDWDFNPNKDHWPDANQVGAGAFGPGFTPPHGGLLGWSPQAQGILTTVPAAPPPASTNRQSGRQPTPISPPLRDSHPQAMQWNSTTFHQALLDPRVRGLYFPAGGSSSGTVNPVPTTASPISSIFSRTGDPAPNMESTTSGFLGPLLVLQAGFFLLTRILTIPQSLDSWWTSLNFLGGAPTCPGQNSQSPTSNHSPTSCPPICPGYRWMCLRRFIIFLFILLLCLIFLLVLLDYQGMLPVCPLLPGTSTTSTGPCKTCTIPAQGTSMFPSCCCTKPSDGNCTCIPIPSSWAFARFLWEWASVRFSWLSLLVPFVQWFAGLSPTVWLSVIWMMWYWGPSLYNILSPFLPLLPIFFCLWVYI。
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