[发明专利]一种降氨氮和亚硝酸氮的水质改良微生态制剂的制备方法

摘要

一种降氨氮和亚硝酸氮的水质改良微生态制剂的制备方法，属于水产养殖技术及生态环境保护技术领域。本发明的微生态制剂由粪产碱杆菌CGMCC NO.1.1786和节杆菌CGMCC NO.1282组成混合菌在一定培养基和发酵温度28℃-32℃、发酵罐发酵24-36小时，发酵培养完成后，灌装或继续稀释或浓缩后加工成液体剂型，制得具有水体降氨氮和降亚硝酸氮作用的水质改良微生态制剂。本发明制剂使用方便，受环境条件影响小，使用量小；使用后可显著降低池塘水体中氨氮和亚硝酸氮的含量，效果持续10-15天，改善池塘水质的环境质量及养殖生物的生存条件的同时，可有效防止养殖生物病害和突发性死亡，提高养殖生物的产量和质量。

主权项

1、一种水质改良微生态制剂的制备方法，其特征是该微生态制剂由粪产碱杆菌CGMCC NO.1.1786和节杆菌CGMCC NO.1282组成混合菌在一定培养基和发酵温度下发酵培养完成后，灌装或继续稀释或浓缩后加工成液体剂型，制得具有水体降氨氮和降亚硝酸氮作用的水质改良微生态制剂；(1)微生物菌种：菌种A：粪产碱杆菌CGMCC NO.1.1786，菌种B：节杆菌CGMCC NO.1282，混合菌：以细菌细胞干重计配比比例：菌种A∶菌种B为1∶0.5～2；(2)培养基：获得大的生物量的通用培养基：有机氮源和碳源作为营养物质；通用培养基配方为：牛肉膏3-5g/L，酵母浸膏0.5-0.8g/L，蛋白胨3-8g/L，葡萄糖5g/L，NaCl 5g/L，pH 7.0-7.5；筛选或检测菌种降氨氮和亚硝酸氮性能的特异性培养基：以菌种的特异性底物亚硝酸氮和铵作为氮源，葡萄糖作为碳源；特异性培养基配方为：葡萄糖15-25g/L，K2HPO4 0.15-0.3g/L；KH2PO4 0.1-0.2g/L；NaNO2 0.1-0.2g/L；NH4Cl0.15-0.35g/L；NaCl 5g/L；MgSO4 0.5g/L；pH 7.0-7.5；无指明情况下均是采用通用培养基培养；(3)菌种发酵制备a)摇床培养：将斜面保存的菌种A和菌种B接入250mL或500mL三角瓶中，通用培养基量为三角瓶容量的1/3，菌种A和菌种B的混合量按混合菌的配比配置，接种量以标准接种环挑满为准；摇床培养14-18h，控制培养温度28-32℃，pH 7.0-7.5，转速150-220rpm；b)种子发酵：接种量6-20mL/L，从摇床培养的三角瓶中接种进50-200L种子发酵罐，通用培养基，控制发酵温度28-32℃，pH 7.0-7.5，种子发酵罐搅拌转速150-220rpm，发酵时间24-32小时；发酵产物直接制备成制剂或作为种子进一步进行发酵罐发酵；c)发酵罐发酵：种子发酵产物作为种子接种入500-2000L发酵罐，进行发酵罐发酵，通用培养基，发酵条件同种子发酵罐发酵；(4)水质改良微生态制剂液体剂型：发酵罐完成发酵后的发酵液，根据对产品活菌含量的要求，进行稀释或浓缩，即得微生态制剂液体剂型；稀释：以通用培养基作为稀释剂，将发酵液稀释2-100倍；采用各种过滤方法，控制过滤装置孔径，保证滤液中活菌含量在105-107个/mL；浓缩：采用离心机10000rpm离心1-2分钟，收集离心后沉淀；或采用4000-5000rpm离心10-20分钟，收集离心后沉淀；或采用过滤装置进行过滤后，收集滤网上菌体；将离心沉淀或过滤滤网上菌体重新悬溶于一定量通用培养基中，获得一定浓度的浓缩液体，保证活菌含量在1010-1012个/mL。