[发明专利]一种共价增强型纤维素酶固定化方法无效
申请号: | 200910039540.X | 申请日: | 2009-05-18 |
公开(公告)号: | CN101555473A | 公开(公告)日: | 2009-10-14 |
发明(设计)人: | 许敬亮;袁振宏;张宇;庄新姝;吕鹏梅;王忠铭;马隆龙;吴创之 | 申请(专利权)人: | 中国科学院广州能源研究所 |
主分类号: | C12N11/08 | 分类号: | C12N11/08;C12N11/06 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 | 代理人: | 莫瑶江 |
地址: | 510640广东省广州市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明提供了一种共价增强型纤维素酶固定化方法。步骤为:1)将载体Eudragit L-100均匀地分散于蒸馏水中,调节pH值为11.0,待其完全溶解后调节pH值至6.5后定容备用;2)先后加入EDC和NHS,室温下活化载体30min;3)加入纤维素酶酶粉,室温下缓慢搅拌固定3~6小时;4)用3M醋酸调节pH值为3.6,离心去上清得到沉淀;5)将沉淀溶解于pH 5.5的醋酸-醋酸钠缓冲液中。本发明可通过溶液pH的变化方便地实现固定化酶的均相酶解和异相回收,也能够确保固定化酶在均相状态下对不溶性纤维素材料的高效酶解,以及酶解后副产物木质素的快速分离,具有反复使用多次,酶活保留率变化不大的优点,制备过程简单方便,可大大降低纤维素酶的使用成本,具有较好的推广应用价值。 | ||
搜索关键词: | 一种 共价 增强 纤维素酶 固定 方法 | ||
【主权项】:
1、一种共价增强型纤维素酶固定化方法,其特征在于包括如下步骤:1)将载体Eudragit L-100均匀地分散于蒸馏水中,用2M的NaOH调节pH值为11.0,待Eudragit L-100完全溶解后,用2M的HCl调节pH值至6.5后定容备用;2)在pH 6.5的Eudragit L-100溶液中,先后加入EDC和NHS,室温下活化Eudragit L-100载体30min;3)在活化的载体溶液中,加入纤维素酶酶粉,室温下缓慢搅拌固定3~6小时;4)用3M醋酸调节pH值为3.6,离心去上清得到沉淀;5)将沉淀溶解于pH 5.5的醋酸-醋酸钠缓冲液中,即得到所需的固定化纤维素酶。
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