[发明专利]组织工程细胞片及其制备方法无效
| 申请号： | 200910042147.6 | 申请日： | 2009-08-26 |
| 公开（公告）号： | CN101629162A | 公开（公告）日： | 2010-01-20 |
| 发明（设计）人： | 陈建苏;王伟 | 申请（专利权）人： | 暨南大学;佛山塑料集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/06 | 分类号： | C12N5/06;C12N5/08;A61L27/38 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 | 代理人： | 裘 晖;陈燕娴 |
| 地址： | 510632广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于组织工程领域，具体涉及一种组织工程细胞片及其制备方法。该细胞片通过以下方法制备：首先通过电子加速器辐射在细胞培养支持物表面合成聚N-异丙基丙烯酰胺水凝胶；然后控制温度使聚N-异丙基丙烯酰胺水凝胶为疏水相，在此相上培养细胞；改变温度，使水凝胶为亲水相，通过高分子膜吸附或夹具钳夹方法，分离出组织工程细胞片。得到的细胞片通过多层化培养或者通过蛋白黏附液黏附得到多层细胞片。本发明得到的细胞片可以保持细胞与细胞间的桥粒结构、ZO-1紧密连接结构和其它细胞间连接结构，可以保留基底膜蛋白及其与黏合有关的许多成分如整合素等，还具有一定的强度。 | ||
| 搜索关键词： | 组织 工程 细胞 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1、一种组织工程细胞片的制备方法，其特征在于具体包括以下步骤：(1)在细胞培养支持物表面覆盖含质量浓度为0.1％～1.5％交联剂N，N′-亚甲基双丙烯酰胺的N-异丙基丙烯酰胺单体溶液；所述N-异丙基丙烯酰胺单体的质量浓度为40％～60％。(2)对步骤(1)所得溶液进行电子加速器辐射合成，总辐射剂量为240kGy～300kGy，连续分三～六次辐射合成，每次辐射量低于200kGy，得到覆盖了聚N-异丙基丙烯酰胺水凝胶的细胞培养支持物；(3)将步骤(2)得到的细胞培养支持物放到4℃的去离子水中，浸泡5～8天，期间换水4～7次，烤干并灭菌后，密封备用；(4)控制温度使聚N-异丙基丙烯酰胺水凝胶为疏水相，将细胞接种到步骤(3)得到的细胞培养支持物中，培养细胞；改变温度，使聚N-异丙基丙烯酰胺水凝胶为亲水相，通过高分子膜吸附或夹具钳夹方法，分离出组织工程细胞片。
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