[发明专利]金晃常绿大花萱草的组织培养方法

摘要

本发明涉及金晃常绿大花萱草的组织培养方法，包括无菌材料的获得，芽的分化和增殖，不定芽壮苗培养，生根培养，炼苗与移栽等步骤。与现有技术相比，本发明大大提高了“金晃”常绿大花萱草的繁殖速度和苗的整齐度，并更好地保持了原有的母本性状，可实现育苗的工厂化大批量生产。

主权项

“金晃”常绿大花萱草的组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(1)无菌材料的获得在“金晃”常绿大花萱草开花时摘取花苞，用自来水冲洗1-3h后于超净工班工作台上，依次利用质量浓度为60-75％的乙醇浸泡10-50s，体积浓度为0.5-2‰的汞浸泡10-30min，再用无菌水冲洗4-6次，利用无菌滤纸吸干花苞表面的水分后，将花苞基部切成0.5-2cm长的节段，接种于花苞诱导培养基上；(2)芽的分化和增殖花苞接种于花苞诱导培养基上，1-3周后开始膨大，出现黄绿色突起，3-5周后可见愈伤组织，再培养1-2个月，将愈伤组织进行分割，切下接入到不定芽增殖培养基进行增殖培养，分化的芽的基部虽有较多愈伤组织，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速且无玻璃化等不良现象，生长发育良好；(3)不定芽壮苗培养在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽中每丛有2-4株能够伸长，其余的丛生芽处于矮化状态，将丛生芽分成单芽或小丛后，转至壮苗培养基上生长，不定芽迅速伸长，15-30天后可以长至2-3cm；(4)生根培养取2-3cm的不定芽的小植株，转接入生根培养基中诱导生根，5-15天后幼苗基部分化出白色的根原基，20-35天后可以长至4-6cm，根系粗壮，须根众多，生根率为90-100％；(5)炼苗与移栽生根培养20-30天，根系长至1-2cm时，选择根系发达、生长健壮的无菌苗，于室内开瓶炼苗1-4天，然后将苗取出，洗净根部的琼脂，栽于温室的苗床中驯化30-45天，即可移栽室外，给予肥水管理，最终的移栽成活率为90-95％。