[发明专利]一种柔嫩艾美耳球虫热激蛋白60基因及其克隆、表达与应用无效
申请号: | 200910055725.X | 申请日: | 2009-07-31 |
公开(公告)号: | CN101988069A | 公开(公告)日: | 2011-03-23 |
发明(设计)人: | 韩红玉;黄兵;颜彦;赵其平;董辉;姜连连;周杰;李洋;郭涛;平宪卿 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
主分类号: | C12N15/30 | 分类号: | C12N15/30;C12P19/34;C12N15/70;C12P21/02;A61K39/012;A61P33/02;C12R1/19;C12R1/90 |
代理公司: | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人: | 王巍 |
地址: | 200241 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的一种新热激蛋白60(Et HSP60)基因,克隆号:ZB2-D07,全长1802bp,含有一个1455bp的完整开放阅读框(ORF),编码484个氨基酸(Genbank登录号FJ911605)。本发明将该基因连接到原核表达载体pET28a(+),构建了原核表达重组质粒pET28a(+)-Et HSP60,并在大肠杆菌系统中进行了表达。通过纯化重组蛋白pET28a(+)-Et HSP60进行SDS-PAGE,再转移至PVDF膜上,用E.tenella卵囊口服免疫鸡的抗血清作为一抗,羊抗鸡IgG作为二抗进行Western-blot分析,表明它有一定的抗原性,能用于制备抗鸡球虫病药物和制备抗鸡球虫病疫苗。 | ||
搜索关键词: | 一种 柔嫩 艾美耳球虫热激 蛋白 60 基因 及其 克隆 表达 应用 | ||
【主权项】:
一种柔嫩艾美耳球虫热激蛋白60基因,其特征在于所述柔嫩艾美耳球虫热激蛋白60基因具有以下序列:TCAGATGTGCATTTAAGGCGATTTGAATAAGCTTGTGGGGGCCACGACTTTGGAAGAGTATAAACTCCACATTGAAAAGGACGCGGCCTTTTGCCGCCGCTTCCAGAACATCGTCGTGGAGGCGCCCAGCAAGGAGAAGGCCCTTTCAATCCTGCAAAGAGTGCGTCCGCACTACGAGCAGTTCCACCAGCTGGAAATCCCGGAAGAAGTGCTGGAGGCGGTGACGAACATGTCGGACCAGTACGTGAAGCAGCGGGCCTTTCCCGACAAGGCGCTGGACCTCCTCGACGAGTCTTGTTCTTGGAAACGCGTTTCCCACAACAAAAAAATAAATGTCCCCAACAAGCAGATCGCGCAGCTCAAGAAGAACAAGCTCCCCGAGGAAGAAGAGGAGCTGAAGAAACTGCAGGAGGAGTTGGCTGCTCTCGAGGCGCTCACTGCGGGGGGGCGGCGGCTGGTGCTGGAGACCAACGACGTGGCCCACATCTTGAGCCAGTGGACTGGAATCCCGATGGGCAAAATGACGGAAGACGAAGTCTCGCGGGTGTTGAGGCTCGCCGACATTTTGTCTCTGAGGGTTGTTGGACAAGACCGAGCAGTGAAGGCCGTGGCCGACGCGCTGGCTATTCAGCGCGCGGGGCTGAGTCCGAAGAACAAGCCGCTGGGCACTTTCCTGTTCCTGGGGTCTTCGGGGGTGGGCAAGACGGAGCTGGCGAAGGCGGTGGCCGAGGAAATGTTTGACTCTGAAAAGAACTTAATCAGACTGGACATGGTGGAATATCAAGAAGCCCACAGCATTTCGCGGCTGATCGGCCCGCCGCCGGGCTACATGGGCAACGACGAGGGCGGGCAGCTCACGGAGGCCGTGCGCCAAAAGCCCCACAGCGTGGTGTTGTTCGACGAAGTCGAAAACGCGCACAAGAACTTGTGGTCTTTGCTGCTGCCGATGCTGGACGAGGGCCACCTGTCGGACTCGAAGGGAAACCGGGTGGACTTTACGAATTGTTTGATAATTTTGACTTCCAATATTGGCCAGCAGTACATTTTGGACAGTTACAAGGAAGTGCGGGCGCTGACGGCTGGCAACGAGAAGGACAAGGCCAGCAGCAACGGCAGCAGCAGCAGCAACGGCGAAGAGCCCGGCAAGTCCTCCTTCAAAGGCACGGGCAAATCCCCCAAAGACATTCTCCGGAGAATGCGCCAGAAGGTTCTTAAGGAGGTCTTCGGCTACTTCAAGCCGCAGGTCATCGGCAGGATGAGCGAGATCATCATATTTGAGCCTCTGGGGGAAACCGCCATGAAGGGGGTTTTGAACTTGAAGCTTTCGGCGCTGCGGAACAGTTTAGCAGCAAAAGGAATTGACTTCAAAGTCGCCGACTCCGCCCTGGGCTACATCTTGGAAAGGGCCTGGTCCCACAAGTTCGGAGGCCGCAGAATGGCCAAGTACCTGGAGAAGTACATAAAGCCCCGAGTGGCGCCGCTTTTGATTTCCGGCAAACTCAAGGCGGGAGACAGAGCCGTCTTGGCGCGCTCCAACACAAACCCCAATCAGCTCAACTTGATTGTGTGCGAGCTGAACGAAGAAGGCGTTTGCAAGCCGGGAACGAAGTACGGCACGAAGCTGGTCACGCAGGAAGTGAAGCCGCAGGACGGAAACGAGGATGAAGAGGACGCAATGGACTAGCAAAAGAATTAAAAGCATTTAAAACATTTAAATGATGCTTTTTATCCCTGGAAAGCGGAGAGACAAAGTGAGGAAATGAGGACGGAGCTCCCGTTTTTGGCTACCGTGAGGCAACTGA所述ATG为起始密码子;TAG为终止密码子。
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