[发明专利]一种高通量的数量性状调控基因分离的方法无效
申请号: | 200910061862.4 | 申请日: | 2009-05-04 |
公开(公告)号: | CN101544974A | 公开(公告)日: | 2009-09-30 |
发明(设计)人: | 王汉中;华玮;刘贵华;王新发;刘静;胡志勇 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院油料作物研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/68 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 | 代理人: | 王敏锋 |
地址: | 430062湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种高通量的数量性状调控基因分离的方法,其步骤是:1)目标性状分离群体的构建:群体为两亲本杂交后代F2,F3,DH系和RIL中的群体;2)群体中极端样本的混合和总RNA分离:将后代分离群体按性状表型划分为三类;3)基因表达分析:利用基因表达分析方法以芯片、EST测序、差减和cDNA-AFLP等,比较两个极端混合样本之间基因表达的异同;4)候选基因的获得和验证:找出两个极端混样之间的差异表达基因,为目标性状相关的候选调控基因,通过转基因、基因表达、分子标记相关性和贡献率分析方法验证基因的功能,得到可调控性状表型的目标基因。适用于所有生物由多基因控制的某一数量性状调控基因的分离,简单、快速、高通量和经济的基因分离方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 通量 数量 性状 调控 基因 分离 方法 | ||
【主权项】:
1. 一种高通量的数量性状调控基因分离的方法,其步骤如下:1)目标性状分离群体的构建:群体为两亲本杂交后代F2,F3,DH系和RIL中的某一群体;2)群体中极端样本的混合和总RNA分离:将后代分离群体按性状表型划分为三类:性状表型极端强,性状表型中等,性状表型极端弱,并将极端强或极端弱的同一类样本分别等量混合成两个极端群体混合样本;3)基因表达分析:利用基因表达分析方法以芯片、EST测序、差减和cDNA-AFLP方法中任一种,比较两个极端混合样本之间基因表达的异同;4)候选基因的获得和验证:找出两个极端混样之间的差异表达基因,为目标性状相关的候选调控基因,通过转基因、基因表达、分子标记相关性和贡献率分析方法验证基因的功能,最终筛选得到调控性状表型的目标基因。
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