[发明专利]集成柱色谱分离与纯化黄姜中甾体皂甙的方法

摘要

本发明涉及一种用集成柱色谱技术分离与纯化黄姜中甾体皂甙的方法，包括以下步骤：将黄姜干粉用乙醇浸提，减压浓缩，得浸膏；往浸膏中加水分散，静置、离心分离、烘干后依次用石油醚、氯仿和甲醇回流提取，提取物减压浓缩至干，得粗甾体皂甙；将粗甾体皂甙通过硅胶柱，用氯仿与甲醇洗脱；收集含甾体皂甙洗脱液，减压浓缩至干，用甲醇溶解，经ODS柱分离，分别收集10.9min、11.9min和12.8min流出液，冻干分别得到甾体皂甙A，B和C。本发明采用集成柱色谱技术，即将开放柱色谱和高压制备柱色谱技术相结合，分离、纯化黄姜中的甾体皂甙，分离时间短，分离的皂甙纯度较高(可以使甾体皂甙的纯度达到98％以上)，生物活性相对较高。

主权项

1.集成柱色谱分离与纯化黄姜中甾体皂甙的方法，包括以下步骤：(1)溶剂浸提将过20目筛的黄姜干粉用体积百分比70-80％的乙醇浸提，提取液减压浓缩，得浸膏；往浸膏中加1-5倍体积的水分散，静置沉降后，离心分离，得离心液和固体两部分；将固体50-70℃烘干后依次用石油醚、氯仿和甲醇回流提取；经甲醇回流提取物减压浓缩至干，得粗甾体皂甙；(2)集成柱色谱分离a.开放柱分离将粗甾体皂甙通过硅胶柱，用氯仿与甲醇体积比为10∶4的洗脱剂洗脱；取样用A试剂显色，若变黄色，则说明含有甾体皂甙；收集含甾体皂甙洗脱液，减压浓缩至干，得浓缩物；b.制备色谱分离纯化将步骤a中处理后得到浓缩物用甲醇溶解，经制备柱分离，制备柱填料为十八烷基硅烷键合硅胶，分别收集10.9min、11.9min和12.8min流出液，冷冻干燥分别得到甾体皂甙A，B和C。