[发明专利]以纳豆芽孢杆菌发酵大豆豆粕生产染料木素蛋白粉的方法

摘要

本发明涉及一种以纳豆芽孢杆菌发酵大豆豆粕生产染料木素蛋白粉的方法，步骤包括：(1)发酵菌株的驯化：得到适应2％、4％、6％、8％、10％(w/v)大豆豆粕发酵培养基且产β-葡萄糖苷酶活性高的纳豆菌株；(2)发酵种子制备：将在各个浓度大豆豆粕底物培养基中仍能高产β-葡萄糖苷酶的纳豆芽孢杆菌接种于试管斜面，培养；(3)发酵培养基制备：以1～3％(w/v)葡萄糖、6～12％(w/v)脱脂豆粕、0.05～0.2％(w/v)Ca²⁺、0.02～0.1％(w/v)Mg²⁺组成发酵培养基，pH 7.2～7.4；(4)发酵：以4～10％(v/v)的接种量将种子培养基接种于发酵培养基中，发酵罐的装液率为40～60％(v/v)，发酵温度32～38℃，pH 7.0～7.5，发酵时间48～72h；(5)喷雾干燥即成。其操作简单，效果显著。

主权项

1、一种以纳豆芽孢杆菌发酵大豆豆粕生产染料木素蛋白粉的方法，其特征在于实施步骤包括：(1)发酵菌株的驯化：将能高产β-葡萄糖苷酶的纳豆芽孢杆菌接种于2％(w/v)的大豆豆粕发酵培养基中，培养成熟后，将发酵液稀释至10-5～10-8后分别平板划线取单菌落；得到的菌株，采用DNS法测定其β-葡萄糖苷酶的酶活力并比较筛选一株产酶活力相对高的菌株；将筛选出来的产酶活力高的菌株，再转接于含4％(w/v)大豆豆粕的发酵培养基中，再培养成熟后，取其发酵液稀释划平板筛菌；筛选方法同上；以此类推，逐级驯化，分别在含有6％(w/v)、8％(w/v)、10％(w/v)大豆豆粕的发酵培养基中驯化该菌种，即得到能分别适应2％(w/v)、4％(w/v)、6％(w/v)、8％(w/v)、10％(w/v)大豆豆粕发酵培养基且产β-葡萄糖苷酶活性高的纳豆菌株；(2)发酵种子的制备：将在各个浓度大豆豆粕底物培养基中仍能高产β-葡萄糖苷酶的纳豆芽孢杆菌接种于试管斜面，培养成熟后，将生长好的斜面菌种接入摇瓶种子培养液中振荡培养成熟后，接种于三级种子罐中，培养16～36h；(3)发酵培养基的制备：以1～3％(w/v)葡萄糖、6～12％(w/v)脱脂豆粕、0.05～0.2％(w/v)Ca2+、0.02～0.1％(w/v)Mg2+组成发酵培养基，pH 7.27.4；(4)发酵：以4～10％(v/v)的接种量将种子培养基接种于发酵培养基中，发酵罐的装液率为40～60％(v/v)，发酵温度为32～38℃，pH控制在7.0～7.5，搅拌转速为140～200r/min，进罐的空气流量为3～6L/min，发酵时间为48～72h；(5)喷雾干燥：将发酵结束后的发酵液按常规进行喷雾干燥，喷雾干燥入口温度130-160℃，出口温度75-90℃，即得到高含量染料木素的蛋白粉。