[发明专利]一种铁氢化酶基因及其编码的氨基酸序列和异源表达系统无效

专利信息
申请号: 200910073445.1 申请日: 2009-12-17
公开(公告)号: CN101712961A 公开(公告)日: 2010-05-26
发明(设计)人: 任南琪;赵鑫;邢德峰;付娜;张璐 申请(专利权)人: 哈尔滨工业大学
主分类号: C12N15/53 分类号: C12N15/53;C12N9/02;C12N15/70
代理公司: 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 代理人: 何强
地址: 150001 黑龙*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要: 一种铁氢化酶基因及其编码的氨基酸序列和异源表达系统,它涉及一种氢化酶基因及其编码的氨基酸序列和异源表达系统。本发明铁氢化酶基因序列如SEQ ID NO:1所示。本发明铁氢化酶基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。铁氢化酶基因异源表达系统按以下步骤构建:一、提取总DNA;二、PCR扩增;三、酶切;四、酶切载体;五、连接;六、转化感受态细胞;七、重组子重组质粒转化入感受态细胞。本发明铁氢化酶基因无需基因改造可直接与原核表达载体pET 28a构建异源表达系统,含重组子pET28a-hydA的E.coliBL21菌液经IPTG诱导,经SDS-PAGE检测能表达分子量为63KD左右的一条外源蛋白,培养24小时后产生可明显检测的H2。
搜索关键词: 一种 氢化 基因 及其 编码 氨基酸 序列 表达 系统
【主权项】:
一种铁氢化酶基因,其特征在于铁氢化酶基因序列如下:ATGGTAAACGTGACGATCAACGGCACCCCCGTGCAGGCGGGCGAAGACACCACCATTCTGGAAGCGGCGGCTTCGGCGGGCATTCATATCCCCACGCTCTGCTACCTGAAGGGCCTCAATGAGATCGGCGCCTGCCGGGTTTGCCTGGTGGAGATTGAGGGCATTGAGAAGTTGGTGACGGCCTGCGGCAACAAGGTGGCGGAAGGCATGGTCATTTCCACCAACAGCCCGCGCGTGCGCGAGGCACGGCGCACCAATGTGGAGCTCATCCTCTCGCAGCACGACTGTTATTGCGCCAGTTGCGCGCGCAGCGGCAACTGCAACCTTCAGTCGCTTTCCAACGACCTCGGTATTCTCGATCTGCCCTACCGGCGGGAAATGCCGGTCTCTGAATGGAACAAGTCGTTTCCGCTCATCCGCGATTTTTCCAAGTGCATCAAGTGCATGCGTTGCGTGCAGGTTTGTGACAAGATCCAGGATATGAACATCTGGGACATTGCCAACACCGGCTCGCGCACCACGGTGGACGTGTCGCAGAACCGCAAAATGGAGGAATCGGACTGTACGCTCTGCGGCCAGTGCATCACGCACTGCCCGGTGGGCGCGCTGCGCGAGCGGGACGACACCGACAAGGCGTTTGCCGCGCTGGCCGATCCGGATACGATCACCGTGGTGCAGATCGCGCCCGCCGTGCGCGCCGCGTGGGGCGAATCACTTGGTCTGCCGCGGGAGCAGGCGACCGCCAAACGGCTGGTGGCCGCGCTGCGCAAGATCGGGTTCCGTTATATCTTCGACACTACGTTCAGCGCCGATCTCACCATCATGGAGGAGGGAAGTGAGTTCCTCGCAAAGCTCCGGAACCGGGAAAACGAAACGTTCCCCATGTTCACTTCCTGCTGTCCCGGTTGGGTGCGCTTTCTGAAATCGCAGTATCCGGACATGGTGCGCCAGCTTTCCACTGCGAAATCACCGCAGCAGATGTTCGGCGCCATCACGAAAAGCTATTATGCCAAGCTGTTGGATGTGGAGCCGGAACGCATCTGCTCCATTTCCGTCATGCCGTGCCTGGCTAAAAAACAGGAAGCCGCCTTGCCCACCATGGACACAGCGGGAGCGGGGCCGGATGTGGACATCGTGCTCACGACGCGGGAGATCGACCGCATGATCCGCGCGGAGGATATCCACCCGGGGGAGCTGCCGGAGGAGGAGTTCGACCAGCCGCTTGGCGTGGGCAGCGGCGCGGGCGTGATTTTCGGCGCCACGGGCGGCGTGATGGAAGCGGCCCTGCGCTCGGCCTACTATCTGGTCACCGGAAAAAATCCGGAGCCCGACGCGTTTGGAAACGTGCGGGGAATGGACGGCTGGAAGGAAGCGGCCATCGACATCGCGGGCACCACGGTGCGTGTAGCGGTGGCCAGTGGTCTGGGCAACGCCCGTCGGCTGGTGGAAGCCTTGCGCAAAGGCGATGTGCAGTACGATTTCGTGGAGATCATGGCCTGCCCCGGCGGCTGCTCAGGCGGCGGGGGGCAGCCCATCGCCGAGGGCGAGGAGCGGGCGGGCGTCCGCGCGGAGACCCTCTACGGGCTGGATAATATCAGCGCGCTGCGGTTTTCACATGAAAACCCGTCCATCGTGCAGGTGTACCGTGACTATCTGGACAAACCGCTCTCGCATCGCGCACATGAGCTGCTCCATACGGCGCATGACGCCTGGGAAATGCCCGGCGCCGCCGCGAAAAAATAA。
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