[发明专利]一种中药组合物中一个孕甾糖苷的提取分离方法

摘要

本发明公开了一种中药组合物中一个孕甾糖苷的提取方法。本发明中药组合物由黄芪、人参、丹参等11味中药组成，临床用于治疗冠心病、高血压病所致轻、中度充血性心力衰竭等有较好疗效，本发明从其活性部位提取分离得到了一个孕甾糖苷，首次报道其来源于中药香加皮，该提取分离方法可用于质量控制或者制备新的制剂。

主权项

一种中药组合物中一个孕甾糖苷的提取分离方法，该中药组合物由如下重量份的原料药制成：黄芪150‑450份、附子40‑120份、人参或党参75‑225份、丹参75‑225份、葶苈子50‑150份、香加皮或南五加皮60‑180份、泽泻75‑225份、玉竹25‑75份、桂枝30‑90份、红花30‑90份、陈皮25‑75份，该孕甾糖苷的结构为Δ5‑pregnene‑3β，16β，20(R)‑triol 3‑O‑[2，‑O‑acetyl‑β‑D‑digitalopyranosyl‑(1→4)‑β‑D‑cymaropyranoside]20‑O‑[β‑D‑glucopyranosyl‑(1→6)‑β‑D‑glucopyranosyl‑(1→2)‑β‑D‑digitalopyranoslde]，其特征在于该孕甾糖苷是经如下步骤制得的：a、按比例称取其中黄芪、人参或党参、葶苈子、泽泻、香加皮，加入8倍量70％乙醇，浸泡30分钟，回流提取3小时，滤过，再加入8倍量70％乙醇，回流提取2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩至在60℃测定相对密度为1.15‑1.20，得醇提浸膏；b、步骤a所得醇提浸膏冷藏过夜，板框过滤，加水稀释至密度为0.1克药材/ml，得中药液；c、大孔树脂加入4倍树脂体积的5％氢氧化钠，充分搅拌，浸泡，水洗至中性，加入95％乙醇浸泡、装柱，以两倍柱体积的95％乙醇冲洗，继水洗至无醇味，备用；d、步骤b所得中药液以1倍柱体积/小时通过树脂柱，收集过柱液；e、用4倍柱体积的水进行洗脱，收集洗脱液，与过柱液合并，减压浓缩呈浓浸膏，记为E1；继续用4倍柱体积的10％乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E2；继续用4倍柱体积的30％乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E3；继续用4倍柱体积的50％乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E4；继续用4倍柱体积的70％乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E5；继续用4倍柱体积的95％乙醇进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩呈浓浸膏，记为E6；f、取E4部分经硅胶柱色谱，氯仿‑甲醇‑水洗脱，分份收集，合并相同流份；g、将步骤f中第四个相同流份减压浓缩干燥，再经开放C18柱色谱，依次用50％甲醇、甲醇洗脱，甲醇部分经HPLC制备纯化，即得目标化合物。