[发明专利]肝再生增强因子基因转染真核细胞的方法及应用无效
申请号: | 200910080850.6 | 申请日: | 2009-03-24 |
公开(公告)号: | CN101845457A | 公开(公告)日: | 2010-09-29 |
发明(设计)人: | 王业东;貌盼勇;刘鸿凌;辛绍杰;游绍莉;胡燕;王志杰 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第三〇二医院 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12P21/02;A61F2/00;C12R1/91 |
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摘要: | 本发明涉及一种人肝再生增强因子转染真核细胞的方法,属于生物工程的生产方法,包括:构建pCDNA3.1(-)HALR质粒,进行HepG2的培养及筛选;pcDNA3.1(-)HALR质粒转染HepG2筛选后所得的肝肿瘤细胞系;然后对转染的肝细胞系进行筛选,用有限稀释法挑选生长迅速的克隆,建立稳定的肝细胞系。本发明的人肝再生增强因子转染真核细胞的方法,具有作为生物人工肝构建的开发的巨大潜力,可利用基因工程技术大量生产,降低成本,应用于生物人工肝研究与临床。除此之外,转染的肝细胞还有可能促进肝细胞移植中移植细胞的生长繁殖或有助于组织器官工程技术的发展等。 | ||
搜索关键词: | 再生 增强 因子 基因 转染 真核细胞 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种人肝再生增强因子基因转染真核细胞的方法,其步骤如下:构建pCDNA3.1(-)HALR质粒;进行HepG2的培养及筛选,得肝细胞系;pcDNA3.1(-)HALR质粒转染HepG2筛选后所得的肝细胞系;然后对转染的肝细胞系进行筛选;用有限稀释法挑选生长迅速的克隆,建立稳定的ALR肝细胞系。
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