[发明专利]一种用于制备生物汽油的工程大肠杆菌有效
| 申请号： | 200910090470.0 | 申请日： | 2009-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN101899412A | 公开（公告）日： | 2010-12-01 |
| 发明（设计）人： | 咸漠;杨建明;郑艳宁;刘炜;徐鑫 | 申请（专利权）人： | 青岛生物能源与过程研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P5/00;C10L1/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 周长兴 |
| 地址： | 266101 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 一种用于制备中碳脂肪醇的工程大肠杆菌和制备中碳脂肪醇的方法，该方法通过在大肠杆菌中过量表达硫脂酶基因，脂酰-CoA还原酶基因和脂肪醛脱羧酶基因等，使大肠杆菌获得生产生物汽油的能力，结合过量表达乙酰-CoA羧化酶基因并敲除大肠杆菌的脂酰-CoA脱氢酶基因，进一步提高工程大肠杆菌的生物汽油的生产能力。该方法可用于新一代生物汽油的的生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 制备 生物 汽油 工程 大肠杆菌 | ||
【主权项】：
1.一种用于制备生物汽油的工程大肠杆菌，通过下述方法得到通过聚合酶链式反应扩增乙酰-CoA羧化酶基因、硫脂酶基因、脂酰-CoA还原酶基因和脂肪醛脱羧酶基因，用胶回收试剂盒回收目的片段，然后分别双酶切目的片段和原核表达载体pET-30a(+)或pACYCDuet-1，载体片断胶回收后，将载体∶基因片段按摩尔比为1-2∶4-5的比例混合，加入T4DNA连接酶后4-7℃连接15-30小时，连接产物38-42℃热击转化E.coliDH5α感受态细胞，涂布平板培养过夜，PCR筛选阳性克隆；阳性克隆提取质粒DNA，酶切和测序鉴定后，热击转化E.coliBL21(DE3)，最后敲除该工程大肠杆菌的fadE基因后即得目标工程大肠杆菌。
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