[发明专利]以酿酒酵母作为生物识别元件快速测定BOD的方法

摘要

本发明公开了属于环境污染监测技术领域的以酿酒酵母作为生物识别元件快速测定BOD的方法。该方法包括选择酿酒酵母作为生物识别元件、利用PVA固定化酿酒酵母制备生物识别元件工艺和利用PVA固定化酿酒酵母生物识别元件对BOD的快速测定；本发明选择酿酒酵母作为测定BOD的识别元件，可以拓宽对多种废水的测定范围、BOD的快速测定结果稳定性和重现性好；利用PVA固定化酿酒酵母制备活性高、选择性强的生物识别元件，可以提高生物响应的稳定性，并保证识别元件的一致性、机械强度和使用寿命，生物识别元件的使用寿命达到3-6个月。本发明可应用于天然水体、工业废水、生物污水以及海水中BOD值的快速测定。

主权项

1.一种以酿酒酵母作为生物识别元件快速测定BOD的方法，其特征在于，该方法包括选择酿酒酵母作为生物识别元件、利用PVA固定化酿酒酵母制备生物识别元件工艺和利用PVA固定化酿酒酵母生物识别元件对BOD的快速测定；所述选择酿酒酵母作为生物识别元件是选择酿酒酵母作为快速测定BOD生物识别元件的主要原因如下：1)酿酒酵母是一种高活性的好氧微生物，同化碳水化合物的能力很强，目前已广泛应用于高浓度有机工业废水的综合治理；2)酿酒酵母自身无毒害作用，不会对环境产生二次污染；3)酿酒酵母的培养条件要求不高，并生长迅速，因此宜于获得；4)酿酒酵母可以长期干燥保存，并能长久保持酶的活力；5)酿酒酵母细胞具有耐渗透压的特点，可适用于海洋污染的监测；所述利用PVA固定化酿酒酵母制备生物识别元件的工艺：将酿酒酵母细胞悬浮于一定量的去离子水中(浓度范围10-20g/100mL(w/v)为)，然后与溶解好的PVA溶液混合，得到均匀的混合液，PVA的最终浓度为8-10％(w/v)，将该混合液滴入饱和硼酸溶液500mL中，充分交联反应10-12小时后取出，用去离子水冲洗3遍，得到作为生物识别元件的固定化酿酒酵母颗粒，放置冰箱中冷藏备用；所述利用PVA固定化酿酒酵母生物识别元件对BOD的快速测定：测量时，固定化微生物颗粒与待测样品在测量室中混合，用微量曝气管进行搅拌和曝气，使其中溶解氧饱和，加热控制温度条件，使固定化微生物颗粒在分解有机污染物的过程中分解水体中可生物降解的有机污染物，并且消耗水体中的溶解氧，使溶解氧浓度不断降低，导致溶解氧逐级降低至一个新的稳定状态；根据两个稳态之间的溶解氧差值，通过标准曲线-线性回归方程即可计算出所测水样的BOD值。