[发明专利]将人羊膜间充质细胞诱导分化成血管内皮样细胞的方法无效
| 申请号： | 200910091859.7 | 申请日： | 2009-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN101633905A | 公开（公告）日： | 2010-01-27 |
| 发明（设计）人： | 曹克富;刘艳军;刘颖;肖静;王瑞兰;张向利;吴亦芳;张红霞;郭丽丽;王月;郭敏;孟昭霞;李荣旗 | 申请（专利权）人： | 北京科润维德生物技术有限责任公司 |
| 主分类号： | C12N5/08 | 分类号： | C12N5/08 |
| 代理公司： | 北京双收知识产权代理有限公司 | 代理人： | 卢 新 |
| 地址： | 100049北京市海淀*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及了一种将人羊膜间充质细胞诱导分化成血管内皮样细胞的方法，它包括：从胎盘中分离出人羊膜组织；清洗上述人羊膜组织；消化清洗后的人羊膜组织；将上述人羊膜组织分离成单个人羊膜间充质细胞；将人羊膜间充质细胞扩增到所需的数目后，将上述人羊膜间充质细胞悬液中加入到含有10％FBS、1×105IU/L青-链霉素、10μg/L VEGF和2μg/LbFGF的M-199内皮细胞诱导培养基中诱导14天后，得到血管内皮样细胞；利用上述方法得到的血管内皮样细胞可以用于重建和修复人体内的血管，激活移植到人体内的组织，使该组织进行正常的新陈代谢。 | ||
| 搜索关键词： | 羊膜 间充质 细胞 诱导 化成 血管 内皮 方法 | ||
【主权项】：
1.一种将人羊膜间充质细胞诱导分化成血管内皮样细胞的方法，它包括：(1)在无菌条件下，从一个胎盘中分离出人羊膜组织，放入生理盐水中浸泡；(2)清洗上述人羊膜组织；(3)消化清洗后的人羊膜组织；(4)将上述人羊膜组织分离成单个人羊膜间充质细胞；(5)将人羊膜间充质细胞扩增到所需的数目后，加入DMEM/F12得到含有人羊膜间充质细胞的悬浊液，使人羊膜间充质细胞的个数为1×106个/ml-2×106个/ml；其特征在于：(6)将上述人羊膜间充质细胞悬液中加入含有10％FBS、1×105IU/L青-链霉素、10μg/LVEGF和2μg/L bFGF的M-199内皮细胞诱导培养基，使人羊膜间充质细胞的个数为1×105个/ml，然后将其接种到至少一个24孔板中，每两天更换上述培养基一次，诱导14天后，得到血管内皮样细胞；(7)取出一部分从步骤(6)中得到的细胞进行免疫荧光染色或透射电镜鉴定，检测得到的细胞是否为血管内皮样细胞。
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