[发明专利]一种筛选不同亚型单克隆抗体的方法有效
申请号: | 200910093730.X | 申请日: | 2009-10-15 |
公开(公告)号: | CN102043051A | 公开(公告)日: | 2011-05-04 |
发明(设计)人: | 赵怀璞 | 申请(专利权)人: | 中国辐射防护研究院 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577 |
代理公司: | 北京天悦专利代理事务所(普通合伙) 11311 | 代理人: | 田明;任晓航 |
地址: | 030006 *** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | 本发明属于单克隆抗体的制备技术,具体涉及一种筛选不同亚型单克隆抗体的方法。该方法在细胞融合后,将分泌不同类型抗体的杂交瘤细胞随机分布于各培养孔内,使用截留分子量在150kD-900kD之间的滤膜将培养上清液中的IgG、IgM区分出来,从而判断该孔细胞内杂交瘤分泌抗体的类型,若该孔细胞分泌所期望的特定类型抗体,则对其进行克隆化培养。该方法减少了杂交瘤克隆化的工作量,避免了筛选的盲目性。 | ||
搜索关键词: | 一种 筛选 不同 单克隆抗体 方法 | ||
【主权项】:
一种筛选不同亚型单克隆抗体的方法,包括如下步骤:(1)取细胞融合后所形成的杂交瘤细胞的培养上清液,离心去除悬浮的细胞及细胞碎片,获得培养上清液A;(2)将适量上清液A加入带有滤膜的孔板,离心收集透过液B;(3)将孔板翻转后,加入洗脱液再次离心,使滤膜截留的组分充分洗脱,并收集截留组分溶液C;(4)将孔板的各孔所对应的A、B、C液分别加入使用免疫原包被的抗原板孵育,根据免疫动物选择相应的酶标二抗,进行ELISA试验;(5)根据试验结果以及期望获得的抗体类型,确定对哪一孔细胞进行克隆化培养。
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