[发明专利]蓝舌病病毒单克隆抗体及制备方法和应用无效

专利信息
申请号: 200910094754.7 申请日: 2009-07-23
公开(公告)号: CN101597334A 公开(公告)日: 2009-12-09
发明(设计)人: 花群义;杨俊兴;詹爱军;阮周曦;曾少灵;曹琛福;吕建强;陈兵;秦智锋;陶虹;周晓黎;艾军 申请(专利权)人: 花群义
主分类号: C07K16/10 分类号: C07K16/10;C12N15/06;C12P21/08;G01N33/577
代理公司: 云南派特律师事务所 代理人: 张 怡
地址: 518010广东省深圳市*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明涉及生物技术领域。本发明所述的蓝舌病病毒单克隆抗体是采用杂交瘤细胞技术,用纯化的BTV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)进行细胞融合,用HAT选择性培养基进行培养后,分别用纯化的BTV抗原、基因工程表达的BTV VP7蛋白抗原和正常仓鼠肾传代细胞(BHK21)对照抗原包被的间接ELISA进行筛选,经有限稀释法筛选克隆,获得能稳定传代并分泌抗特异性BTV VP7蛋白的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,并制备BTV VP7蛋白的McAb小鼠腹水,制备而成的抗BTV VP7蛋白的单克隆抗体。本发明提供的BTV VP7蛋白单克隆抗体的特异性强,腹水效价高,亲和力高,制备方法简单,BTV VP7蛋白单克隆抗体可以用于BTV抗体和抗原的检测方法,为我国蓝舌病的防控提供重要的技术手段。
搜索关键词: 蓝舌病 病毒 单克隆抗体 制备 方法 应用
【主权项】:
1、一种蓝舌病病毒单克隆抗体,其特征在于是采用杂交瘤细胞技术,用纯化的BTV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)进行细胞融合,用HAT选择性培养基进行培养后,分别用纯化的BTV抗原、基因工程表达的BTV VP7蛋白抗原和正常仓鼠肾传代细胞(BHK21)对照抗原包被的间接ELISA进行筛选,经有限稀释法筛选克隆,获得能稳定传代并分泌抗特异性BTV VP7蛋白的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,并制备BTV VP7蛋白的McAb小鼠腹水,制备而成的抗BTV VP7蛋白的单克隆抗体。
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