[发明专利]EV71型病毒抗原的检测方法有效
| 申请号： | 200910094972.0 | 申请日： | 2009-09-15 |
| 公开（公告）号： | CN101655495A | 公开（公告）日： | 2010-02-24 |
| 发明（设计）人： | 李琦涵;谢忠平;龙润乡;董承红;杨蓉;白惠珠;李华;崔萍芳;刘龙丁 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院医学生物学研究所 |
| 主分类号： | G01N33/569 | 分类号： | G01N33/569;G01N33/543;G01N33/52;G01N1/34;C07K14/085;C07K1/14 |
| 代理公司： | 昆明正原专利代理有限责任公司 | 代理人： | 徐玲菊 |
| 地址： | 650000云南*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明提供一种EV71型病毒抗原检测方法，它将待检EV71型病毒抗原、抗原阳性对照和抗原阴性对照分别加入酶标板的孔中，再在酶标板的各孔依次加入稀释度为1∶500～3000的生物素标记EV71型抗体，稀释度为1∶2000～10000的辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，TMB显色液A和B，最后在酶标板的各孔中加入终止液后，置于酶标仪上，在450nm波长下，用空白孔调零后检测吸光度A值，即得检测结果。本检测可从一般细胞培养病变法的3-5天缩短为数小时，在较短时间内确诊患者感染的病原体，且在基层医院和防控中心就可完成检测，能及时对症治疗和对疫情进行预防控制，是一种特异性好、灵敏度高、方便快捷的EV71病毒抗原检测方法。 | ||
| 搜索关键词： | ev71 病毒 抗原 检测 方法 | ||
【主权项】：
1、一种EV71型病毒抗原的检测方法，其特征在于经过下列步骤：A、按50～150μl/孔的量，将待检EV71型病毒抗原、抗原阳性对照和抗原阴性对照分别加入酶标板的孔中，并留空白调零孔，放入湿盒中，于37℃保温0.5-2小时后，洗板3～5次；B、按50～150μl/孔的量，在A步骤的酶标板的各孔中，加入稀释度为1∶500～3000的生物素标记EV71型抗体，放入湿盒中，于37℃保温0.5～2小时后洗板3～5次；C、按50～150μl/孔的量，在B步骤的酶标板的各孔中，加入稀释度为1∶2000～10000的辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，放入湿盒中，于37℃保温0.5～2小时后洗板3～5次；D、在C步骤的酶标板的各孔中，分别加入TMB显色液A和B各50μl/孔，混匀，放入湿盒中，37℃保温10～15分钟；E、在D步骤的酶标板的各孔中按50～100μl/孔的量加入终止液后置于酶标仪上，在450nm波长下，用空白孔调零后检测吸光度A值，即得检测结果。
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