[发明专利]野蚕1型乙酰胆碱酯酶活性蛋白的制备方法及其用途无效
| 申请号： | 200910095343.X | 申请日： | 2009-01-08 |
| 公开（公告）号： | CN101487014A | 公开（公告）日： | 2009-07-22 |
| 发明（设计）人： | 张传溪;郎国竣 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/55 | 分类号： | C12N15/55;C12N15/85;C12N9/16;G01N21/78;C12Q1/46 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人： | 金 祺 |
| 地址： | 310027浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种野蚕1型乙酰胆碱酯酶活性蛋白的制备方法，包括以下步骤：1)将编码具有野蚕1型乙酰胆碱酯酶并去除32个C端氨基酸残基的基因的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成分泌非融合蛋白的野蚕1型乙酰胆碱酯酶表达pFasBac系列载体；2)将表达载体转入宿主昆虫细胞，形成野蚕1型乙酰胆碱酯酶的重组细胞；3)在适合分泌表达野蚕1型乙酰胆碱酯酶多肽的条件下，培养上述重组细胞；4)用procainamide亲和层析柱分离出具有野蚕1型乙酰胆碱酯酶蛋白活性的多肽。该野蚕1型乙酰胆碱酯酶活性蛋白可用于农药的有效性筛选和检测。 | ||
| 搜索关键词： | 野蚕 乙酰 胆碱酯酶 活性 蛋白 制备 方法 及其 用途 | ||
【主权项】：
1、一种野蚕1型乙酰胆碱酯酶活性蛋白的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)、将编码具有野蚕1型乙酰胆碱酯酶并去除32个C端氨基酸残基的基因的核苷酸序列可操作地连于表达调控序列，形成分泌非融合蛋白的野蚕1型乙酰胆碱酯酶表达pFasBac系列载体；2)、将上述步骤所得的表达载体转入宿主昆虫细胞，形成野蚕1型乙酰胆碱酯酶的重组细胞；3)、在适合分泌表达野蚕1型乙酰胆碱酯酶多肽的条件下，培养上述步骤的重组细胞；4)、用procainamide亲和层析柱分离出具有野蚕1型乙酰胆碱酯酶蛋白活性的多肽。
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