[发明专利]检测慢性粒细胞白血病的单链DNA适配子及其制备方法无效
| 申请号： | 200910117587.3 | 申请日： | 2009-11-11 |
| 公开（公告）号： | CN101748210A | 公开（公告）日： | 2010-06-23 |
| 发明（设计）人： | 韩跃武;刘玲玲;姚海燕;查成喜 | 申请（专利权）人： | 兰州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/115;C12N15/10 |
| 代理公司： | 甘肃省知识产权事务中心 62100 | 代理人： | 田玉兰 |
| 地址： | 730000 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种检测慢性粒细胞白血病的单链DNA适配子及其制备方法，体外合成长度为88个碱基的随机单链DNA文库，采用生物素-链霉亲和素磁珠法制备次级文库，以正常人中性粒细胞为反筛细胞，利用SELEX技术筛选出与慢性粒细胞白血病K562细胞特异结合的适配子。将筛选得到的适配子回收纯化后连接pGEM-T质粒载体，经蓝白筛选后，随机挑选24个克隆子进行序列测定。采用荧光标记引物法检测亲和力，并用DNAMAN软件对适配子序列进行一级结构同源性分析和二级结构预测。一级结构分析发现无同源序列，但可分为6个家族(family)。二级结构分析表明：适配子形成的茎环、凸环结构可能是与K562细胞特异性结合的结构基础。24个克隆适配子中，第5、10、21、22、24号适配子与慢性粒细胞白血病K562细胞的结合率较高，分别为40.6％、45.2％、40.8％、42.2％、41.6％。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 慢性 粒细胞 白血病 dna 配子 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种检测慢性粒细胞白血病的单链DNA适配子，其特征在于：该适配子具有序列表中SEQ ID No.1至SEQ ID No.5所述的核苷酸序列的任意一种。
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