[发明专利]绒山羊4E-BP1基因cDNA编码区核苷酸序列

摘要

本发明涉及从体外培养的绒山羊胎儿成纤维细胞分离的编码4E-BP1蛋白的cDNA的核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列。本发明通过比对已知的牛、马、人、小鼠、黑猩猩、猪的4E-BP1基因cDNA的核苷酸序列，找到保守区，然后根据牛4E-BP1基因cDNA序列(GenBank登录号NM_001077893)，在不打乱氨基酸编码序列的前提下设计出了一对用于RT-PCR扩增绒山羊4E-BP1基因cDNA编码区片段的简并引物并用这对引物通过RT-PCR方法扩增出了特异性片段，测序后得到了绒山羊4E-BP1基因cDNA的编码区的232bp的核苷酸序列和与它的前231bp核苷酸序列对应的氨基酸序列。获得的这232bp的核苷酸序列可进一步用于绒山羊4E-BP1基因全长cDNA的克隆及用于通过RT-PCR或杂交的方法检测4E-BP1基因的组织表达特异性，也可用于重组表达得到蛋白后制备检测4E-BP1的抗体。

主权项

本发明涉及一段从体外培养的绒山羊胎儿成纤维细胞分离的编码4E-BP1蛋白的cDNA，更具体地说涉及编码4E-BP1蛋白质的cDNA编码区核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列。目前应用RT-PCR方法克隆基因并获得相应的核苷酸序列是获得基因(cDNA)核苷酸序列的常用方法。本项发明设计了一对引物并应用这对引物通过RT-PCR方法扩增出了绒山羊4E-BP1基因cDNA的编码区特异性片段，经过测序后得到这一片段的232bp的核苷酸序列，其特征是在还没有绒山羊4E-BP1基因核苷酸序列的情况下，通过比较已知的牛、马、人、小鼠、黑猩猩、猪的4E-BP1基因的核苷酸序列，找到保守区，然后根据牛4E-BP1基因cDNA序列(NM_001077893)，在不打乱氨基酸编码序列的前提下设计PCR简并引物，进而通过RT-PCR方法扩增出了绒山羊4E-BP1基因cDNA的编码区片段，测序后得到了232bp的核苷酸序列和与它的前231bp的核苷酸序列对应的氨基酸序列，这一绒山羊4E-BP1基因cDNA编码区片段的核苷酸序列和与它的前231bp的核苷酸序列对应的氨基酸序列在国内外是首次获得。基于上述说明的本发明的技术特征，本发明的独立权利要求表述为：一种自绒山羊分离的多核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列，是下列序列之一：1)序列表中SEQ ID NO：1的cDNA序列；2)与序列表中SEQ ID NO：1的cDNA序列的前231bp的核苷酸序列对应的标注为SEQ ID NO：2的氨基酸序列。