[发明专利]一种皮肤组织工程种子细胞的扩增方法有效
申请号: | 200910155159.X | 申请日: | 2009-12-07 |
公开(公告)号: | CN102086451A | 公开(公告)日: | 2011-06-08 |
发明(设计)人: | 韩春茂;胡信雷;王新刚;于玮洁;孙华凤;有传刚;胡行 | 申请(专利权)人: | 韩春茂 |
主分类号: | C12N11/02 | 分类号: | C12N11/02;C12N5/071;A61L27/38;A61L27/60;A61K35/36;A61P17/02 |
代理公司: | 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 | 代理人: | 王从友 |
地址: | 310009 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及一种组织工程种子细胞的培养方法。皮肤组织工程种子细胞的扩增方法,该方法包括以下的步骤:①在生物反应器加入大孔微载体,水化及灭菌后加入培养基50~100ml成纤维细胞培养基,加入成纤维细胞个进行培养;②待成纤维细胞贴附于微载体上后生长接近微载体表面积的50%时,抑制成纤维细胞的增殖,静置后倾去培养液;③将上述得到的载体无菌无钙镁PBS冲洗后,加入表皮细胞培养基及表皮细胞,继续搅拌培养,直至细胞长满载体,即可获得皮肤组织工程种子细胞。本发明培养的细胞量及功能都能明显增加,减少了细胞的损伤,细胞可以直接用作组织工程皮肤构建的种子细胞,效果优于表皮细胞悬液及表皮细胞膜片。 | ||
搜索关键词: | 一种 皮肤 组织 工程 种子 细胞 扩增 方法 | ||
【主权项】:
一种皮肤组织工程种子细胞的扩增方法,其特征在于该方法包括以下的步骤:①在生物反应器加入0.5~2g大孔微载体,水化及灭菌后加入培养基50~100ml成纤维细胞培养基,加入成纤维细胞1×106~10×106个进行培养;②待成纤维细胞贴附于微载体上后生长接近微载体表面积的50%时,抑制成纤维细胞的增殖,静置后倾去培养液;③将上述得到的载体无菌无钙镁PBS冲洗后,加入表皮细胞培养基50~100ml及1×106~10×106个表皮细胞,继续搅拌培养,直至细胞长满载体,即可获得皮肤组织工程种子细胞。
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