[发明专利]一种以川贝母植株叶为外植体的鳞茎快速增殖方法

摘要

本发明公开了一种以川贝母植株叶为外植体的鳞茎快速增殖方法，该方法包括愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖和分化小鳞茎、以及小鳞茎生长各步骤，所采用的诱导愈伤组织培养基为MS+6-BA1.0～2.0mg·L-1+IAA0.1～0.5mg·L-1+蔗糖30～50g·L-1+琼脂6.0～7.0g·L-1，愈伤组织增殖培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5～1mg·L-1+蔗糖30～50g·L-1+琼脂6.0～7.0g·L-1，分化鳞茎培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.1～0.4mg·L-1+蔗糖30～50g·L-1+琼脂6.0～7.0g·L-1；小鳞茎生长培养基为MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖30～50g·L-1+琼脂6.0～7.0g·L-1。本发明可以大量快速繁殖川贝母鳞茎，且培养成本低，繁殖率高。

主权项

一种以川贝母植株叶为外植体的鳞茎快速增殖方法，其特征在于包括下列步骤：(1)愈伤组织的诱导：选取已经消毒处理的川贝母植株叶为外植体，将其在超净工作台上切成小片，接种于诱导愈伤组织培养基MS+6‑BA1.0～2.0mg·L‑1+IAA0.1～0.5mg·L‑1中；(2)愈伤组织增殖：将(1)步骤诱导产生的愈伤组织切成适当大小并转接到愈伤组织增殖培养基MS+6‑BA2.0mg·L‑1+NAA0.5～1mg·L‑1中进行增殖培养；(3)愈伤组织分化鳞茎：选取上述生长紧密的愈伤组织转接入鳞茎分化培养基MS+6～BA2.0mg·L‑1+NAA0.1～0.4mg·L‑1中进行鳞茎分化培养；(4)鳞茎的生长：切取(3)步骤诱导产生的小鳞茎以2～4个为一组接入到鳞茎生长培养基MS+6‑BA2.0mg·L‑1+NAA0.5mg·L‑1中，待鳞茎长至所需体积后即可收获；上述所有培养基的配制pH值为5.6～6.0、蔗糖30～50g·L‑1、琼脂6.0～7.0g·L‑1；上述培养条件均为温度18～22℃、每天光照8～12小时、光照强度为1000～1800lx。