[发明专利]显示作为除虫菊酯生物合成酶的活性的蛋白质、编码该蛋白质的基因和整合有该基因的载体有效
申请号: | 200910165393.0 | 申请日: | 2009-08-11 |
公开(公告)号: | CN101649308A | 公开(公告)日: | 2010-02-17 |
发明(设计)人: | 松田一彦;菊田幸雄 | 申请(专利权)人: | 学校法人近畿大学;大日本除虫菊株式会社 |
主分类号: | C12N9/20 | 分类号: | C12N9/20;C12N15/55;C12N15/63 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 | 代理人: | 段承恩;田 欣 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | 本发明的课题是提供通过确定与除虫菊酯的生物合成相关的酶的氨基酸序列、及其基因的碱基序列,制作整合有该基因的载体、转化体,并将这些制作技术应用于生长较快的植物,从而高效地生成除虫菊酯的方法。本发明提供一种基因,是编码作为可以从能生成除虫菊酯的植物体内提取的酶的下述(i)或(ii)的蛋白质的基因,(i)包含序列号1所示的氨基酸序列的蛋白质,(ii)包含对序列号1所示的氨基酸序列置换、缺失、插入、和/或添加1个或多个氨基酸而得到的氨基酸序列、且显示作为除虫菊酯生物合成酶的活性的蛋白质。 | ||
搜索关键词: | 显示 作为 除虫菊 生物 合成 活性 蛋白质 编码 基因 整合 载体 | ||
【主权项】:
1.一种除虫菊酯生物合成酶,是通过下述操作而生成的分子量约40000的蛋白质,所述操作是以从除虫菊花制备的粗酶溶液为原料,使用(1R)-反式菊酰辅酶A和(S)-除虫菊醇酮作为检测有无除虫菊酯合成酶活性功能的底物,通过利用硫酸沉淀进行的蛋白质粗分级来得到沉淀物,然后对该沉淀物利用使用疏水性树脂的分批法来进行粗纯化,对上述粗纯化所得的酶溶液,依次进行利用离子交换色谱法进行的纯化、利用疏水作用色谱法进行的纯化、通过凝胶过滤进行的纯化的各工序。
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