[发明专利]一种竹黄菌催化制备苝醌色素的方法

摘要

一种竹黄菌催化制备苝醌色素的方法，属于生物工程技术领域。本发明采用竹黄菌，将底物萘醌、肉桂酸等催化制备成苝醌色素。催化过程采用：A)细胞的液态培养过程，将底物加入培养体系中进行，苝醌色素产量可达2.9g/L，转化率可高达9.7％；或B)将液态发酵培养得到的细胞放入含有底物的反应体系中进行，苝醌色素产量可达35.3g/L，转化率可高达39.7％；或C)细胞的固态培养过程，将底物加入培养体系中进行，苝醌色素产量可达1.5g/100g，转化率可高达46％。本发明采用产苝醌色素竹黄菌株以特定底物转化生产竹红菌素，转化率高，成本低，步骤简便，可用于工业化生产，具有良好的工业应用前景。

主权项

1.一种竹黄菌催化制备苝醌色素的方法，其特征在于以竹黄菌株Shiraia sp.SUPER-H168为出发菌株，将底物催化制备成苝醌色素，催化过程采用：A)细胞的液态培养过程，将底物加入培养体系中进行；或B)将液态发酵培养得到的细胞放入含有底物的反应体系中进行；或C)细胞的固态培养过程，将底物加入培养体系中进行；工艺为：A)细胞的液态培养过程，将底物加入培养体系中进行：底物添加量为0.1-5g/L，一次性加入不再补加，底物加入时间为发酵开始后的0-40小时；发酵温度为24-32℃，发酵时间为48-72小时；或B)将液态发酵培养得到的细胞放入含有底物的反应体系中进行：通过液态培养得到细胞，以100g/L的浓度将湿菌体细胞悬浮于生理盐水中，并加入甲苯使质量浓度达2％，30℃处理1h，8000r/min离心15min，取沉淀得到处理后的竹黄菌细胞；将处理过的竹黄菌细胞以1-100g/L量加入反应体系中，底物浓度控制在1-30g/L，并加入0-40mmol/L腺嘌呤核苷三磷酸，反应体系pH 6-8，底物添加量为1-30g/L，反应温度28-30℃，发酵时间为1-10小时，反应体系选用水缓冲液反应体系、水缓冲液-有机溶剂反应体系、或水缓冲液-离子液体反应体系；所述工艺A)或工艺B)的液态发酵培养基组成为：碳源5-50g/L，氮源5-50g/L，磷酸氢二铵2g/L，磷酸二氢钾1g/L，硫酸镁0.5g/L；在发酵罐内装入发酵罐体积70％的培养基，灭菌冷却后接入竹黄菌，接种量为10％，起始pH和发酵过程pH均为自然；或C)细胞的固态培养过程，将底物加入培养体系中进行：底物添加量为1-20g/100g干基，一次性加入不再补加，底物加入时间为发酵开始后的0-5天；固态发酵培养基组成为：基质为玉米、小麦、黄豆、赤豆或绿豆，另添加占培养基质量5％葡萄糖和0.5％NH4NO3，基质含水量为20％-70％，培养温度为24-32℃，pH为5-8，培养时间7-10天；所用底物选用萘醌类化合物、肉桂醛、肉桂醇、L-苯丙氨酸或苯甲酸。