[发明专利]建立哮喘血清树突状细胞内皮穿越模型的方法无效
| 申请号： | 200910184012.3 | 申请日： | 2009-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN101633906A | 公开（公告）日： | 2010-01-27 |
| 发明（设计）人： | 周林福;殷凯生;顾晓燕;张明顺;季晓辉 | 申请（专利权）人： | 周林福 |
| 主分类号： | C12N5/08 | 分类号： | C12N5/08;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 南京中新达专利代理有限公司 | 代理人： | 孙 鸥;朱 杰 |
| 地址： | 210029*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种建立哮喘血清树突状细胞内皮穿越模型的方法。本发明采用离心法获取血清，采用免疫磁珠法获取单核细胞，采用胰酶消化法获取人脐静脉内皮细胞，明胶预处理，将传代的内皮细胞悬液加入培养板并长至单层，哮喘患者血清重悬单核细胞，并加至内皮细胞单层上，充分洗涤内皮细胞单层，洗涤内皮细胞单层，回收悬浮细胞，得到哮喘血清树突状细胞内皮穿越模型。本发明解决了缺少一个实验平台的模型进行真正模拟单核细胞在哮喘患者体内的分化成熟和迁移功能的实验的缺陷。本发明提供了一种客观模拟单核细胞在体内迁移分化为树突状细胞的非细胞因子依赖的体外模型，而且哮喘血清是患者真实的内环境。 | ||
| 搜索关键词： | 建立 哮喘 血清 树突 细胞 内皮 穿越 模型 方法 | ||
【主权项】：
1.建立哮喘血清树突状细胞内皮穿越模型的方法，其步骤在于：(1)采用离心法，从哮喘患者外周血获取血清；(2)采用免疫磁珠法，从正常人外周血获取单核细胞；(3)采用胰酶消化法，从正常产妇脐带获取人脐静脉内皮细胞；(4)明胶预处理24孔细胞培养板，将传代的内皮细胞悬液加入培养板并长至单层；(5)哮喘患者血清重悬单核细胞，并加至内皮细胞单层上；(6)2小时后，充分洗涤内皮细胞单层；(7)36小时-48小时后，洗涤内皮细胞单层，回收悬浮细胞；(8)得到哮喘血清树突状细胞内皮穿越模型。
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