[发明专利]一种乳酸菌活菌总数快速计数方法

摘要

一种乳酸菌活菌总数快速计数方法，取次甲基蓝0.1-1g，碳酸钠0.5-2g，蒸馏水100ml，混匀，静置0.5-2h后，过滤，静置2h；称取1克菌粉或移取1ml乳酸菌培养液，用无菌水进行10-100倍稀释，制成菌悬液；移取菌悬液，用无菌水进行10倍梯度稀释；吸取5μl菌悬液置于载玻片上，加5μl上述染液，盖上盖玻片；选择10～20个视野计算乳酸菌活菌总数，并乳酸活菌数平均值；计算每克菌粉/每毫升菌液中含有的乳酸活菌数为上述公式，其中，C为盖玻片的面积，B为一个视野的面积，A为每个视野中乳酸活菌数平均值。本发明步骤简化，误差小，重现性好，省去漫长的培养时间，是一种快速、简便的乳酸菌活菌总数计数方法，可实现乳酸菌活菌数在线检测。

主权项

1、一种乳酸菌活菌总数快速计数方法，其特征是(1)取次甲基蓝0.1-1g，碳酸钠0.5-2g，蒸馏水100ml，混匀，静置0.5-2h后，过滤，静置2h；(2)称取1克菌粉或移取1ml乳酸菌培养液，用无菌水进行10-100倍稀释，震荡混合均匀制成菌悬液；移取菌悬液，用无菌水对菌悬液进行10倍梯度稀释，震荡混合均匀，总稀释倍数以显微镜视野中菌体数为20-200个为宜；(3)用微量定量移管吸取5μl菌悬液置干净载玻片上，加5μl的上述染液，盖上盖玻片；(4)将菌液浸片置显微镜下镜检，选择浸片4个角和中央的10～20个视野计算乳酸菌活菌总数，并求取每个视野中乳酸活菌数平均值；(5)计算每克菌粉/每毫升菌液中含有的乳酸活菌数为：其中，C为盖玻片的面积，B为一个视野的面积，A为每个视野中乳酸活菌数平均值。