[发明专利]一种利用HPLC测定黑大豆种质种皮中花色苷构成谱及含量的方法有效

专利信息
申请号: 200910194053.0 申请日: 2009-11-20
公开(公告)号: CN101701945A 公开(公告)日: 2010-05-05
发明(设计)人: 张瑞芬;张名位;魏振承;张雁;唐小俊;池建伟;邓媛元 申请(专利权)人: 广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所;广东省农业科学院农业生物技术研究所;广东宝桑园健康食品研究发展中心
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/36
代理公司: 广州知友专利商标代理有限公司 44104 代理人: 宣国华
地址: 510610 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 一种利用HPLC测定黑大豆种质种皮中花色苷构成谱及含量的方法,包括以下步骤:(1)制备黑大豆供试品溶液;(2)确定色谱条件;(3)按(2)的色谱条件,取黑大豆供试品溶液和标准品溶液注入高效液相色谱,通过对照各花色苷与标准品溶液的保留时间和加标定性的方法获得各花色苷的构成谱;(4)按(2)的色谱条件,取黑大豆供试品溶液注入高效液相色谱,用标准曲线法计算出黑大豆种质种皮中各花色苷单体的含量。该方法具有准确性、灵敏度高及重现性好等特点;且避免了以往用pH示差法通过分光光度计测定花色苷含量只能测定总含量和结果准确性差的缺点;能检测到黑大豆种皮中的各个花色苷的组分及含量。
搜索关键词: 一种 利用 hplc 测定 大豆 种质 种皮 花色 构成 含量 方法
【主权项】:
一种利用HPLC测定黑大豆种质种皮中花色苷构成谱及含量的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制备黑大豆供试品溶液;(2)确定色谱条件:色谱柱:XBridge C18柱(4.6×250mm,5.0μm,预柱4.6×20mm),流动相:10%(V/V)甲酸的水溶液A和乙腈∶甲醇∶水∶甲酸=25∶25∶40∶10(V/V)的混合溶液B,流速:1ml/min,柱温:25℃,检测波长:520nm,进样量:20μL,记录时间:20min,洗脱方式:梯度洗脱;(3)按(2)的色谱条件,取黑大豆供试品溶液和标准品溶液注入高效液相色谱,通过对照各花色苷与标准品溶液的保留时间和加标定性的方法获得各花色苷的构成谱;(4)按(2)的色谱条件,取黑大豆供试品溶液注入高效液相色谱,用标准曲线法计算出黑大豆种质种皮中各花色苷单体的含量。
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