[发明专利]禽流感病毒原位PCR检测探针及其制备方法有效
| 申请号： | 200910214054.7 | 申请日： | 2009-12-22 |
| 公开（公告）号： | CN101818208A | 公开（公告）日： | 2010-09-01 |
| 发明（设计）人： | 杨素;陈博文;沙才华;廖明;徐海聂;廖秀云 | 申请（专利权）人： | 中华人民共和国珠海出入境检验检疫局 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12P19/34;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州市红荔专利代理有限公司 44214 | 代理人： | 王贤义 |
| 地址： | 519015 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种特异性好、敏感性高的禽流感病毒原位PCR检测探针及其制备方法。该方法从GeneBank下载禽流感病毒NP基因序列，通过比对选取NP基因中较为保守的片断，设计一对引物，通过RT-PCR方法扩增270bp的目的片段，并分子克隆构建重组质粒测序，测序后证实本研究设计的引物扩增序列与AIV各亚型NP基因具有较高同源性，可达92％以上，利用地高辛标记扩增产物制备探针。该探针用于间接原位RT-PCR检测方法对细胞内的禽流感病毒进行检测和定位，可特异性的检测禽流感病毒，而新城疫、传染性法氏囊等病毒检测为阴性，具有良好的特异性，探针可以检测到约1pg/uL的质粒DNA，具有高敏感性。 | ||
| 搜索关键词： | 禽流感 病毒 原位 pcr 检测 探针 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种禽流感病毒原位PCR检测探针，其特征在于，运用RT-PCR法制备所述检测探针的特异性引物序列为SEQ1，SEQ2：SEQ1：5’-AAGCGGAGGAAACACCAAC-3’；SEQ2：5’-ATGTCAAAGGAAGGCACGAT-3’。
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