[发明专利]旱半夏组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种旱半夏组织培养快速繁殖方法。利用组织培养技术诱导无菌旱半夏块茎产生愈伤组织并分化产生无菌苗，然后取无菌苗的叶片、叶柄及愈伤组织块作为外植体，再经愈伤组织诱导、分化培养，增殖培养，生根培养后，大量繁殖旱半夏组培苗。本发明外植体来源丰富，体积较大，接种成活率高，操作简单快捷，繁殖系数高，速度快，适合工厂化育苗。

主权项

旱半夏组织培养快速快繁方法，包括以下步骤：1)配制培养基，基本培养基和其它组培阶段培养基的各组分与每升所含量为：基本培养基：用MS培养基，附加蔗糖15-45g/L，琼脂10g/L，调节pH5.8；愈伤组织诱导培养基：MS中添加KT 1.0-3.0mg/L和2，4-D 1.0-3.0mg/L；分化培养基：MS中添加KT 1.0-3.0mg/L和2，4-D 1.0-3.0mg/L；增殖培养基：MS中添加KT 0.2-2.0mg/L和2，4-D 0.2-2.0mg/L；生根培养基：MS中添加KT 1.0-2.0mg/L和NAA 0-1.0mg/L；2)培养无菌苗：将旱半夏块茎进行灭菌处理后，切成5mm左右的小块，将其移至MS+KT 2.0mg/L+2，4-D 2.0mg/L的培养基上产生愈伤，其后转入MS+KT3.0mg/L+2，4-D 1.0mg/L的培养基上使其分化，将产生的丛芽块，再将其切成单芽块移至MS基本培养基上生长得到无菌苗；3)诱导愈伤组织：在无菌条件下，将步骤2)培养出的无菌苗的叶片、叶柄及愈伤组织块切成5mm大小的组织，接种在愈伤组织诱导培养基上，诱导形成愈伤组织；4)分化培养：将步骤3)诱导形成的愈伤组织移至分化培养基上使其分化出芽；5)增殖培养：将步骤4)生成的丛芽切成单芽(包含基部的愈伤组织块)，接种至增殖培养基上进行增殖培养，使其再分化出芽；6)生根培养：将步骤5)形成的丛芽块切成单芽(包含基部的愈伤组织块)，接种在生根培养基中进行生根培养；7)移栽：当步骤6)的生根组培苗生长至3-5cm，根数在5根以上时，移栽入基质中，在温室中培养至成苗。