[发明专利]携带基于hGluc基因的miRNA传感器的重组AAV病毒库及用途无效
申请号: | 200910223723.7 | 申请日: | 2009-11-18 |
公开(公告)号: | CN102061311A | 公开(公告)日: | 2011-05-18 |
发明(设计)人: | 吴小兵;田文洪;董小岩 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;北京五加和分子医学研究所有限公司 |
主分类号: | C12N15/86 | 分类号: | C12N15/86;C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100052 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明具体涉及用携带了受miRNA调控表达Gluc基因的重组AAV病毒作为检测活细胞中miRNA活性的生物传感器,即“受miRNA调控表达Gluc基因的重组AAV病毒传感器”,将该生物传感器的重组AAV病毒库有序地包被在细胞培养支持物上(如96孔板或384孔板上),在无菌条件下制成可以长期储存放置的重组AAV病毒阵列。在应用该重组AAV病毒阵列时,将活细胞悬液加入该生物传感器的重组AAV病毒库阵列中,重组AAV病毒将“反式感染”所加入的细胞并表达Gluc基因、分泌到细胞培养上清液中;细胞中内源性的miRNA将特异性地和与之互补的miRNA靶序列(mirT)相结合,并对Gluc的表达产生不同程度的抑制作用。通过检测细胞培养上清中Gluc酶的活性,可以比较和计算出细胞内各种miRNA的活性水平。 | ||
搜索关键词: | 携带 基于 hgluc 基因 mirna 传感器 重组 aav 病毒库 用途 | ||
【主权项】:
本发明所述的AAV病毒反向感染技术,其技术特征是将重组AAV病毒预先包被并晾干在细胞培养支持物上,以便在加入活细胞悬液时,所包被的AAV病毒能有效反向感染后加入的细胞。
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