[发明专利]表达嗜热子囊菌光孢变种tapro基因的毕赤酵母工程菌株无效
| 申请号： | 200910230147.9 | 申请日： | 2009-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN101717734A | 公开（公告）日： | 2010-06-02 |
| 发明（设计）人： | 李多川;李安娜;谢晨;张婕;张佳 | 申请（专利权）人： | 山东农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12R1/84;C12R1/645 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 271018 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明是一种表达嗜热子囊菌光孢变种(Thermoascus aurantiacus var.levisporus)热稳定丝氨酸蛋白酶基因tapro的毕赤酵母工程菌Pichia pastorisGS-TAPRO-18。通过RT-PCR及RACE，TAIL-PCR等方法从嗜热子囊菌光孢变种(T.aurantiacus var.levisporus)获得热稳定丝氨酸蛋白酶基因tapro，将该基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K，获得表达重组质粒pPIC9K/tapro，转化毕赤酵母GS115，从中筛选出表达热稳定丝氨酸蛋白酶基因tapro的毕赤酵母工程菌株GS-TAPRO-18。该工程菌蛋白酶表达量高达1.15mg/mL，酶活为178.92U/mL，酶在60℃是稳定的，在70℃保温60min，仍有60％的活性，80℃的半衰期为50min，具热稳定性，在工业和生物学领域具有广阔的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 子囊 菌光孢 变种 tapro 基因 酵母 工程 菌株 | ||
【主权项】：
一种表达嗜热子囊菌光孢变种tapro基因的酵母工程菌株，其特征在于该菌为一种毕赤酵母，通过RT-PCR及RACE，TAIL-PCR等方法从嗜热子囊菌光孢变种(T.aurantiacus var.levisporus)获得热稳定丝氨酸蛋白酶基因tapro，将该基因克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K，获得表达重组质粒pPIC9K/tapro，转化毕赤酵母GS115，从中筛选出表达热稳定丝氨酸蛋白酶基因tapro的毕赤酵母工程菌株GS-TAPRO-18。
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